代谢控制发酵实验报告二三.docVIP

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代谢控制发酵实验报告二三

实验:一、实验目的 二、实验原理三、实验四、实验步骤五、六、思考题实验:一、实验目的二、实验原理255nm特征性吸收峰。可借以进行定量测定。 三、实验 紫外分光光度计 四、实验步骤1、标准曲线:取0.001M的柠檬酸溶液于50毫升容量瓶中,从滴定管中加0.001M高锰酸钾溶液至反应达终点,稀释至刻度,使浓度分别成为:0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0、2.2、2.4、2.6、2.8、3.0×10-4M。分别用紫外分光光度计进行测定,在255nm吸收峰处测定其吸收强度值,用蒸馏水作参比,曲线在3.0×10-4M浓度范围内成一直线。 2、滴定:取柠檬酸发酵液于50毫升容量瓶中,进行适当的稀释,使最终浓度在上述标准曲线的范围内。加入0.001M高锰酸钾溶液,温度控制在60℃约10分钟左右,溶液颜色由黄色变成深黄色即达到终点。反应完结定容,用紫外分光光度计测定。 3、测定:把电源、氢灯接通后,选择狭缝宽度为0.25毫米,扫描速度4毫米/厘米,纸速10秒/厘米。用10毫米石英吸收池。选好条件,把参比溶液(没有加入高锰酸钾反应的发酵液)和样品溶液(加入高锰酸钾反应的发酵液)放于光路上,固定波长在295nm处把透光率调至100%,然后测定吸收值,根据朗伯-比耳定律,由K值计算或从标准曲线上求得其克分子浓度,可换算得出,柠檬酸百分比浓度。 五、六、思考题

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