天山雪莲愈伤组织提取物对人成骨肉瘤细胞MG-63增殖-大连普瑞康.PDFVIP

·2900 · 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷第 19 期 2015 年 10 月 天山雪莲愈伤组织提取物对人成骨肉瘤细胞 MG-63 增殖及分化的影响 1 1 1 2* 1* 王南 ，唐琴 ，姬芳玲 ，许青 ，包永明 1. 大连理工大学生命科学与技术学院，辽宁大连 116024 2. 沈阳师范大学粮食学院，辽宁沈阳 110034 摘要：目的研究天山雪莲愈伤组织提取物（extract from callus of Saussureainvolucrate, ESI ）对人成骨肉瘤细胞MG-63 增殖及 分化的影响，探讨 ESI 抗骨质疏松的作用及机制。方法以MG-63 为研究对象，采用 MTT 法和乳酸脱氢酶(LDH)法检测 ESI 对成骨细胞增殖的影响，相关试剂盒检测碱性磷酸酶（ALP ）活性和羟脯氨酸（Hyp ）水平，茜素红染色法观察对矿化骨结 节形成的影响；实时荧光定量 PCR （RT-PCR ）检测骨保护素（OPG ）和核因子-κB 活化因子受体配体（RANKL ）基因表达 水平；Western blotting 法检测 OPG/RANKL 蛋白水平；检测 p38 特异性抑制剂 SB203580 对 ESI 作用于成骨细胞增殖、分化、 矿化以及 OPG/RANKL 表达的影响。结果 ESI 低于 125 μg/mL 对成骨细胞无细胞毒性，31.25、62.5 μg/mL 对成骨细胞生长 有促进作用；ESI 显著提高 ALP 活性、Hyp 水平以及矿化骨结节形成；显著上调 MG-63 细胞 OPG mRNA 水平，下调 RANKLmRNA 水平，上调 OPG/RANKL 蛋白水平；SB203580 显著抑制 ESI 对成骨细胞增殖、ALP 活性、矿化结节形成的 促进作用以及对胶原蛋白积累量和 OPG/RANKL 值的提高作用。结论 ESI 能够促进成骨细胞增殖、分化和矿化，其机制可 能与调节 OPG 和 RANKL 基因表达有关，并且可能通过 p38 丝裂原活化蛋白激酶（MAPK ）通路进行信号转导。 关键词：天山雪莲；愈伤组织；成骨细胞；I 型胶原蛋白；骨保护素；核因子-κB 活化因子受体配体；p38 丝裂原活化蛋白激酶 中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)19 - 2900 - 08 DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.19.014 Effectofextract from callus of Saussurea in volucrate on proliferation and differentiation of osteosarcoma cell MG-63 1 1 1 2 1 WANG Nan , TANG Qin , JI Fang-ling , XU Qing , BAO Yong-ming 1. School of Life Science and Biotechnology, Dalian University of Technology, Dalian 116024, China 2. College of Grain Science and Technology, Shenyang Normal University, Shenyang 110034, China Abstract:Objective To investigate the effect of extract from callus of Saussureainvolucrate(ESI) on the proliferation and differentiation of osteosarcoma cells MG-63 and explore its anti-osteoporosis and mechanism. Methods Using human osteosarcoma cells MG-63 for th