多管发酵实验之计算.PDFVIP

飲用水中大腸桿菌群檢測方法－多管發酵法草案 NIEA E231.53B 一、方法概要 本方法係用以檢測飲用水中革蘭氏染色陰性，不產生內生孢子之桿狀 好氧或兼性厭氧菌，且能在 35 ± 1 ℃、48 ± 3 小時發酵乳糖並產生酸及氣 體之大腸桿菌群（Coliform Group）；所產生之結果以「100 mL 水中之最 大可能數（MPN / 100 mL）」表示 100 mL 飲用水中存在之大腸桿菌群數 目。 二、適用範圍 本方法適用飲用水水質及飲用水水源水質水樣中大腸桿菌群之檢測。 三、干擾 （一）水樣中含有抑制或促進大腸桿菌群生長之物質時會影響水樣之檢測結 果。 （二）檢測使用的玻璃器皿及設備含有抑制或促進大腸桿菌群生長之物質時會 影響水樣之檢測結果。 四、設備及材料 （一）量筒： 100 至 1000 mL 之量筒。 （二）吸管：有 0.1 mL 刻度之 10 mL 滅菌玻璃吸管或市售無菌塑膠吸管， 或無菌微量吸管（micropipet）。 （三）試管：大小約 150 ×15 mm 之試管或有蓋螺旋試管。 （四）發酵管（fermentation tube）：大小約 22 × 9 mm 之玻璃管。 （五）錐形瓶：200 至 2000 mL 之可滅菌硼矽玻璃製品。 （六）採樣容器：容量 250 mL 以上無菌之硼矽玻璃瓶或無菌塑膠有蓋容器， 或市售無菌袋。 （七）冰箱：溫度能保持在4 ± 2℃ 者。 （八）培養箱：溫度能保持在 35 ± 1℃ 者。 （九）天平：待測物重量大於 2 g 時，須能精秤至 0.01 g；待測物重量不大於 2 g 時，須能精秤至 0.001 g。 2 2 （十）高壓滅菌釜：溫度能維持在 121 ℃（壓力約 15 lb / in 或 1.1 Kg / cm ） 滅菌 15 分鐘以上者。 （十一）高溫乾熱烘箱熱：如用於玻璃器皿等用具之滅菌，溫度須能維持在 160 ℃ 達 2 小時或 170 ℃ 達 1 小時以上。 （十二）接種環：為白金或鎳鉻合金製，適用於細菌接種或移植，亦可使用無 菌塑膠製品。 （十三）pH 計：精確度達 0.1 pH 單位。 五、試劑 （一）試劑水：蒸餾水或去離子水，導電度在 25 ℃ 時小於 2 μmho / cm（μ S / cm）。 （二）培養基，應使用市售商品化培養基。 1.硫酸月桂酸胰化蛋白（Lauryl sulfate tryptose broth，簡稱 LST） 1 倍濃度 LST 培養基含有下列成份： 胰化蛋白（Tryptose） 20.0 g 乳糖（Lactose） 5.0 g 氯化鈉（NaCl） 5.0 g 磷酸氫二鉀（K HPO ） 2.75 g 2 4 磷酸二氫鉀（KH PO ） 2.75 g 2 4 硫酸月桂酸鈉（Sodium Laur