米粉中菌落总数的不确定度评估报告.docVIP

关于编号为2011-QW504米粉中菌落总数 不确定度评估报告 1 目的 评估编号为米粉中菌落总数的不确定度。 2 依据 GB 4789.2-2010 食品微生物学检验 菌落总数的测定 3 适用范围 食品中菌落总数的测定 4 方法概要 4.1样品制备 在无菌环境下称取25g样品，加入225mL生理盐水（0.85%）无菌稀释液，8000r/min均质1~2min，制成1：10样品匀液。 4.2 样品稀释 用无菌移液管吸取1mL上述稀释液于事先加有9mL无菌生理盐水的无菌试管中，摇匀，制成1：100的样品匀液。按同样的方法制成1：1000的样品匀液，每个稀释度各取1mL稀释液加入无菌空培养皿中，并作两个平行。 4.3 培养 及时将15~20 mL46℃琼脂倒入培养皿中，旋转摇匀。琼脂凝固后放于36±1℃培养箱中培养48±2h。 4.4 菌落计数 手工计数培养所得菌落数或菌落计数器记录菌落数量。 5 数学模型 Y=x 6 不确定度识别及计算 6.1 不确定度来源分析 按照上述数学模型及方法概要，其不确定度主要来源有以下3方面： 稀释过程引入的标准不确定度u1； 加样体积的标准不确定度u2； 测量结果重复性的标准不确定度u3。 6.2 稀释过程引入的标准不确定度u1 1 mL移液管（A级）最大允许误差MPE=±0.008 mL，按矩形分布，k=31/2，其标准不确定度u1v=0.008/31/2=0.0046mL；无菌室温度控制在20±5℃，查相关手册得知水的体积膨胀系数为2.1×10-4/℃，按矩形分布，k＝31/2，则温度对移液管的不确定度分量u1t＝1×5×2.1×10－4/31/2＝0.00061mL。一次稀释过程引入的不确定度u1＝（u1v2＋u1t2）1/2＝0.0046mL，本实验最多有3次稀释过程，则u1rel＝31/2×u1/1=0.0080。 6.3 加样体积引入的标准不确定度u2 同6.2计算u2rel= u1/1=0.0046 6.4 测量结果重复性引入的标准不确定度u3 本实验对该米粉样品进行了15次测量，其结果见表1。鉴于微生物测量结果分散性较大，其最大值和最小值之间可相差2~3个数量级，因此不能直接利用测量数据作不确定度评估，而需要对数据做以下处理。 6.4.1 对xi取对数lgxi，然后分别计算lgxi平均值、残差、残差平方和并列入表1中。 表1 米粉菌落总数15次重复测量数据及相关计算值 序号 测量值xi 对数值lgxi 残差lgxi-lg 残差平方和(lgxi-lg)2 1 2400 3.3802 -0.0020 0.0000 2 1300 3.1139 -0.2683 0.07197 3 5700 3.7559 0.3737 0.1396 4 1800 3.2553 -0.1269 0.01611 5 3700 3.5682 0.1860 0.03459 6 1500 3.1761 -0.2061 0.04249 7 3800 3.5798 0.1976 0.03903 8 1400 3.1461 -0.2361 0.05574 9 2600 3.4150 0.0328 0.001073 10 1200 3.0792 -0.3030 0.09183 11 4100 3.6128 0.2306 0.05316 12 3200 3.5051 0.1229 0.01511 13 1600 3.2041 -0.1781 0.03172 14 1900 3.2788 -0.1035 0.01070 15 4600 3.6628 0.2805 0.07870 和值 40800 50.73320.6819 均值 2720 3.3822 6.4.2 计算对数值的标准偏差s(lgxi)即分散性u(lg) 7 扩展不确定度的计算 lgx的不确定度，因而u3不能和u1，u2计算合成不确定度。下面分两种情况讨论不确定度分量对菌落总数不确定度的影响。 7.1 u1和u2对测量结果的影响 u1和u2的合成不确定度u1,2=(0.00462+0.00802)1/2=0.0092，取包含因子k=2，即扩展不确定度U=0.018，在不考虑测量重复性的情况下，该样品的菌落总数范围为2720×（1±0.018），即菌落总数在2671与2769之间。 7.2 u3对测量结果的影响 由6.4可知u3=u（lgx）=0.05698，取置信概率p=95%，自由度v=15-1=14，查t分布表得包含因子k=k95（15）=2.13，得扩展不确定度U=2.13×0.05698=0.1214，即lgx的置信区间为[3.3822-0.1214,3.3822+0.1214]，即[3.2608,3.5036