硕士论文答辩 板蓝根不饱和脂肪酸在小鼠急性心脏移植排斥模型中的应用.pptVIP

板蓝根不饱和脂肪酸在小鼠急性 心脏移植排斥模型中的应用 答辩人：王永志 导师：齐忠权 教授 研究进展 目的 方法 结果和结论 汇报内容 研究进展 环孢菌素（CsA） 他克莫司（FK-506） 雷帕霉素（RAPA） 霉酚酸酯（MMF） 雷公藤 朱花 青藤 白芍 山茱萸 冬虫夏草 板蓝根 中药免疫抑制剂 临床常用免疫抑制剂 板蓝根，是一种传统中药材。常用别名：靛青根、蓝靛根、大青根。 抗菌抗病毒 清热解毒、凉血消肿、利咽 调节免疫功能 抗肿瘤 广西医科大学 秦箐副教授 6种单体：B、D、E、F、J、K 板蓝根单体 在体内抑制小鼠S180肉瘤的生长 在体外抗人肝癌细胞BEL-7402活性 抗肿瘤 在体内逆转人肝癌原位移植瘤耐药 在体外逆转肝癌细胞株BEL-7404/ADM耐药 逆转耐药 目 的 从6种板蓝根单体中筛选出具有免疫抑制作用的成分； 在不改变治疗效果的前提下，使用单体来减少临床免疫抑制剂的用量。 方 法 细胞实验（体外） 动物实验（体内） 免疫作用机制探讨 小鼠急性心脏移植排斥模型：移植物生存期 移植物病理学检测（HE） 移植物排斥相关因子检测（qRT-PCR） 受体鼠血清排斥相关因子检测 (ELISA) 淋巴细胞相关基因表达水平检测（qRT-PCR） 淋巴细胞转化实验：筛选最有效单体 单体对T细胞的抑制作用 单体对CD8+T细胞的抑制作用 混合淋巴 细胞反应 淋巴细胞转化实验 （筛选最有效单体） Ｂ Ｄ Ｆ Ｋ Ｊ Ｅ 细胞实验结果 对照组 FK-506组 半剂量FK-506组 单体K组 半剂量FK-506+单体K组 分 组 单体K对T细胞活性的影响 细胞实验结果 单体K对CD8+T细胞活性影响 细胞实验结果 移植物生存期 16.5天 17.5天 术后连续给药10天 移植物存活时间（d） 动物实验结果 9天 移植物病理学检测 HE（100X） 对照组 ? FK-506组 K组 FK-506组 ? FK-506+K组 作用机制检测结果 移植物排斥等级评分 3.8 1.5 2.6 2.5 1.5 作用机制检测结果 移植物排斥相关因子检测 （qRT-PCR） 作用机制检测结果 受体鼠血清相关因子检测 (ELISA) 作用机制检测结果 淋巴细胞增殖相关基因表达水平检测 （qRT-PCR） 作用机制检测结果 结 论 单体K具有明显的免疫抑制作用，可以抑制T细胞和CD8+T细胞的活性，半剂量FK-506+K联合使用的效果最好，证明单体K与FK-506之间存在协同抑制作用。 单体K 可以延长移植心脏的存活时间，半剂量FK-506+K联合使用的效果与全剂量FK-506接近，进一步证明单体K与FK-506之间存在协同抑制作用。 单体K与半剂量FK-506联合使用可以明显减少淋巴细胞对移植物的浸润，降低血清和移植物中IL-2和IFN-γ的表达，增加血清和移植物中IL-10的表达。 已发表文章 1. Wang Y (一作), Qin Q, Chen J, et al. Synergistic effects of Isatis tinctoria L. and tacrolimus in the prevention of acute heart rejection in mice. Transpl Immunol. 2009. 2. Baiyi Xie, Jibing Chen, Junjie Xia, Yongzhi Wang, et al. Combined costimulation blockade inhibits? accelerated? rejection ?mediated?by?alloantigen-primed?memory?T?cells?in?mice. Immunol Invest. 2009. 3. Liang H, Liao C, Qi Z, Sha C, Xie B, Chen J, Xia J, Wang Y, et al. Rapamycin or tacrolimus alone fails to resist cardiac allograft accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells in mice. Transpl Immunol. 2010. 4. Baiyi Xie, Jibing Chen, Feng Wang, Tianshu Lan, Yongzhi Wang,et al. Monoclonal antibody treatment to prolong the