生活饮用水标准检验方法微生物指标幻灯片.pptVIP

4.免疫磁珠捕获 捕获原理: 标记A抗体的磁珠 具有A抗原的C/G DYNAL MIX 1混合器 MPC-1磁极 MPC-S磁极 5.免疫磁珠与孢（卵）囊复合物的分离 60min 5min 10min 染色镜检 6.染色及镜检 单克隆免疫荧光染色（FA-异硫氰酸荧光素） 或 DAPI(4,6-二氨基-2-苯基吲哚)染色 荧光显微镜（Differential Interference Contrast, DIC） 隐孢子虫 贾第鞭毛虫 两虫的单抗染色结果 隐孢子虫的单克隆抗体染色结果 隐孢子虫 DAPI 染色结果 贾第鞭毛虫的单克隆抗体染色结果 贾第鞭毛虫 DAPI 染色结果 贾第鞭毛虫孢囊和隐孢子虫卵囊在荧光镜下的特征 1.在镜下可见苹果绿色的孢（卵）囊。 2.孢（卵）囊的形状、大小符合描述。 3.膜与胞质的对照，膜的荧光要强一些。 4.孢（卵）壁的完整性（孢囊可能会失去！） 7.结果的计算、报告和检测限 每升水中的孢（卵）囊数计算公式： Y=（X×V）/（V1×V2） Y:每升水中的孢囊或卵囊的数目 X：计数样本的体积中孢囊或卵囊的数目 V：离心后再悬浮的体积，单位为mL V1：计数样本的体积，单位为mL V2：过滤后水的体积，单位为L 计算分析的检出限: D=V/(V1×V2) D:每升孢囊或卵囊的检测限 V:离心后再悬浮的体积，单位为mL V1：计数样本的体积，单位为mL V2：过滤后水的体积，单位为L 两虫检测的质量控制: 免疫荧光质量控制:针对免疫荧光试剂盒,由两个试验组成(阴、阳性对照）;1次/周。 整个程序的质量控制：从采样 镜检（阴、阳性对照）。1次/三个月。 两虫检测所需要最基本的设备： 1.蠕动泵 2.滤芯的淘洗装置 3.高速离心机 4.磁力混合器、磁极 5.荧光显微镜 谢谢! 生活饮用水卫生标准GB5749-2006 生活饮用水标准检验方法GB5750-2006 微生物指标及微生物检验的介绍 广东省CDC微生物检验所 严纪文 我国旧的饮用水水质标准是1985年颁布实施的GB5749-85，标准检验方法为GB5750-85。该标准与国外的饮用水标准相比，主要差别在于微生物指标项目少，缺少有机物和消毒副产物指标。微生物指标只有细菌总数和总大肠菌群2项，不能确切的评价水质的卫生状况。 修订后的标准，微生物学指标增加为6项：菌落总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌、贾第鞭毛虫和隐孢子虫。 同时在资料性附件中增加了肠球菌和产气荚膜梭状芽胞杆菌。 水质常规指标及限值 修订前 修订后 微生物指标 限值 微生物指标 限值 细菌总数 100 CFU/mL 菌落总数/（CFU/mL） 100 总大肠菌群 每100mL水样中不得检出 总大肠菌/（MPN/100mL或CFU/100mL） 不得检出 粪大肠菌群 每100mL水样中不得检出 耐热大肠菌/（MPN/100mL或CFU/100mL） 不得检出 游离余氯 在与水接触30min后应不低于0.3mg/L,管梢末水不应低于0.5mg/L 大肠埃希氏菌/（MPN/100mL或CFU/100mL） 不得检出 水质非常规指标及限值 修订前 修订后 微生物指标 限值 微生物指标 限值 - 菌落总数/（CFU/100mL） 500 小型集中式供水和分散式供水部分水质指标及限值 修订前 修订后 微生物指标 限值 微生物指标 限值 - 贾第鞭毛虫/（个/10L） 1 - 隐孢子虫/（个/10L） 1 生活饮用水水质参考指标及限值 修订前 修订后 微生物指标 限值 微生物指标 限值 - 肠球菌/（CFU/100mL） 0 - 产气荚膜梭状芽胞杆/（CFU/100mL） 0 一、菌落总数 修订前 修订后 细菌总数 原理：细菌总数是指水样在一定条件下培养后（培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等）所得1ml水样所含菌落的总数。按本规范规定所得结果只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数 培养条件：36±1℃ 24h 菌落总数 定义：水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h后，所得1ml水样所含菌落的总数。 36±1℃ 48h 二、总大肠菌群（埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属、肠杆菌属） 除多管发酵法、滤膜法外，增加了酶底物检测方法 多管发酵法 修订前 修订后 多管发酵法原理：总大肠菌群系指一群在37℃ 培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌群主要来源于人畜粪便，具有指示菌的一般特征，故以此作为粪便污染