黄秋葵果胶的流变学性质研究.pptVIP

研究背景 研究对象——黄秋葵（okra） 一年生草本植物，产于非洲，新型绿色食品 面粉——烘烤后又抗氧化活性 种子——富含蛋白质 豆荚——富含多酚，黄酮类物质 粘液——富含多糖，果胶。可作为天然食用级乳化剂、增稠剂、乳化稳定剂等，在食品行业应用广泛。 研究背景 研究背景 研究目的 研究表明，黄秋葵豆荚粘液中引起其粘度的物质有鼠李糖，半乳糖，半乳糖醛酸，葡糖糖醛酸。这些多糖中含有重要的结构即糖醛酸，不同的提取方法可以利用这一结构，提取出不同组分和性质的提取物以满足食品工业需求。 利用不同的提取方法提取黄秋葵豆荚粘液中的多糖，表征它们的流变学性质。为今后提取具有不同流变学性质的黄秋葵多糖找到各自的最优提取方法，以便在食品中的各种用途。 研究背景 研究方法 多糖的提取——三种连续性提取 简单提取 流变学研究——稀溶液流变学性质测定 浓度流变学性质测定 稳态剪切测定 振荡测定 材料与方法 原料 新鲜质软的成熟黄秋葵豆荚 5-9cm 购买后立即-20℃冷冻保藏 试剂 所有用水均为超纯水 所有相关试剂纯度均为分析纯 材料与方法 酒精不溶的固形物的分离 原料去籽去花萼，冷冻干燥 两份20g干燥样品分别于300mL70%乙醇中，40℃浸泡1h，过滤，丙酮洗涤滤渣，得酒精不溶性提取物AIS 多糖提取 连续提取——热缓冲溶液可溶性固形物HBSS—螯合剂可溶性固形物CHSS—稀碱溶液可溶性固形物DASS 简单提取——pH6 材料与方法 连续提取 20gAIS用600mL三种缓冲溶液连续提取 20gAIS→0.05M NaAc缓冲溶液，70℃，pH5.2，30min，重复三次→HBSS→0.05M EDTA+0.05M NaAc+0.05M 草酸钠中，70℃，30min ，重复两次→CHSS→0.05MNaOH和20mMNaBH40℃， 30min，重复两次→DASS→离心，5000g 25min→冷冻干燥→不溶性物质进行下一步提取 简单提取 20gAIS→PH6.0 0.1M 磷酸缓冲溶液600mL 70℃，30min，重复三次→离心 8000g 30min 25℃→冷冻干燥→作为pH6.0的实验对照 材料与方法 分子排阻色谱（SEC） 洗脱液——含有0.02g/dLNaN3 的超纯水，流速1mL/min 2.5mg/mL样品注射入SEC系统 蛋白质含量测定 将蛋白质中的氮氧化为硝酸盐，在酸性条件下用2.6-甲基苯酚使得氮氧化为硝基苯酚，然后进行光度测量，氮含量x6.25=蛋白质含量。 材料与方法 流变学性质测定 溶解——将0.1M pH 7.0的NaCl与索伦森磷酸盐缓冲溶液混合，用0.02g/dL NaN3 作为保藏剂，配制浓度为0.01-10.0%g/dL的黄秋葵提取物溶液，连续搅拌整夜保证充分溶解。 测定——特性粘度[η] 20℃由乌氏粘度计测粘度，根据Huggins公式计算特性粘度[η] Huggins公式ηsp/c=[η]+kh[η]2 ηsp=（ηsolution/ηsolvent）-1 kh=Huggins常数 材料与方法 流变曲线 20℃下由Bohlin Gemini 200HR流变仪测定，采用55mm 2°锥板—平板夹具，测量范围0.01-1000s-1 用交叉模型获得完整的流变曲线，符合以下关系 结果分析 提取物性质 HBSS——提取物多含乙酰化鼠李糖，带有短的含半乳糖的侧链 CHSS——提取物多糖含有聚半乳糖醛酸 DASS——提取物含有大量的半乳糖和半乳糖醛酸 所有的结果都和简单的在ph6下的提取物对照。 由于CHSS是在中间加入，所以可能会影响下一步的组分和物性 结果分析 分子大小 SEC洗脱图为图1，每个峰的最大分子量如表1所示，这些都是通过和已知分子量的葡聚糖对比所得。 结果分析 分子大小 DASS和HBSS都有部分重叠的两个峰（peak2和peak3），而pH6提取物中就没有重叠峰，这说明前两者提取方法使得提取物中的生物聚合物增加。 洗脱图显示不同分子量的分配与不同生物大分子聚合物的种类相关。说明通过不同的pH和组分的修饰，可以得到不同组分和性质的提取物的相。 结果分析 稀释溶液流变学测定 多糖决定流变学是因为其很大的体积都被水合大分子占有。 特性粘度在生物大分子的性质中很重要，它被用来判断提取物被单独聚合物分子所占有的体积。 在高浓度NACL的静电屏蔽下，提取物不受静电反应的影响，特性粘度反应了大分子链所占有