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(课件)-慢性萎缩性胃炎(CAG)动物实验
Company Logo Logo 慢性萎缩性胃炎(CAG)动 物 实 验 中医学综合实验PBL课程 第三小组:章渊源 贾友冀 杜倩 吴瑕 石建才 杨芮姗 王国栋 2009-3-20 Company Logo 人类疾病动物模型 Animal models for human diseases: 是指为生物医学研究和阐明人类疾病的发生机理及建立诊断、预防和治疗方法而制作的具有人类疾病模拟表现的实验动物。 * Company Logo CAG动物造模法 生物制模法 ——CHLO、Hp感染猫、鼠、猴等动物造模 (简便、价廉、易于建立。对Hp疫苗在防治Hp感染的实验研究中意义重大) 理化损伤法 ——放射损伤法、口服氨水法、幽门放置弹簧改良法、胃肠吻合术、化学致癌物诱变 (大多以单一因素试验, 虽然造成慢性胃炎, 但没能建立典型的模型,且很不稳定。) 主动免疫结合胃粘膜损伤的造模方法 ——大鼠:皮下注射佐剂抗原0.3ml,1个月后重复注射1次,结合胆汁及50热水灌胃连续70d (与人类免疫因素造成的CAG相似,但制作复杂,技术成本高,不稳定,难以大规模的推广) 有中医特色的证病结合模型 疾病局部结构性变化+中医临床证候表现 [1]刘友章,欧志穗.慢性萎缩性胃炎实验动物模型研究.中国中西医结合消化杂志,2004,4(12):119-121 Company Logo CAG中医辨证分型 肝胃不和证 脾胃虚弱证 脾胃湿热证 胃阴不足证 胃络瘀血证 Company Logo CAG病证结合模型 脾气虚型 肝 郁 型 肾 虚 型 气虚血瘀型 阳虚型和阴虚型 脾胃湿热型 胃肠燥热型 Company Logo 脾气虚模型(1) 耗气破气加饮食失节法 普通级Wistar大鼠24只,雌雄各半平均体重为235 g(雌)和310 g(雄)。以厚朴、枳实、大黄按3∶3∶2比例常规制成100%煎剂,隔日1次灌服,每只4 mL/次(雄),或每只3 mL/次(雌)。同时隔日喂饲料,共26 w。实验结束后处死动物,取肝脏、肺脏、脾脏、胸腺肾脏、心脏和胃进行观察。 苦寒泻下法 昆明系健康雄性小鼠40只,随机编号称重分为大黄泻下组和番泻叶泻下组,每组20只,于谷雨时节造模。大黄泻下组每日上午灌服100%大黄煎剂0.5 mL/只,番泻叶泻下组每日上午灌服100%番泻叶水浸液0.5 mL/只,持续8 d。造模成功后处死小鼠,取全肝、全脾。刘汶等[7]选取健康2月龄纯系雌性Wister大鼠,平均体重(220±50)g。将印度产番泻叶以20 mL水中放入1 g番泻叶的比例投入沸水中浸泡,冷却后使用。然后按每次20 mL/kg,2次/d的量给大鼠灌胃,20 d造模。 过劳加饮食失节法 Wistar雄性大鼠隔日在跑步机上跑步30 min;单日以精炼猪油灌胃,每次2 mL,每天2次;双日喂大白菜,不限量,自由进水。分别于造模第15 d、20 d、25 d随机处死动物。 Company Logo 脾气虚模型(2) X射线照射法 60日龄Wistar大鼠60只,雌雄均有,体重(200±30)g。每只大鼠单笼饲养,按250 rad/min照射剂量进行腹外照射,7 d后进行第2次加强,造模后次日即进行实验观察,第33 d处死动物,取样并作各种检查。 秋水仙碱法 60日龄wistar大鼠,雌雄均有,体重(200±30)g,造模时间共25 d,每只大鼠单笼饲养,每日按规定用量喂饲秋水仙碱水溶液。造模后,次日即进行实验观察,第26 d处死动物,取大鼠胃窦部、空肠及回肠组织作各种检查。其病理改变与X线照射法所造成的病理改变十分相似。 利血平法 80日龄SD大鼠,体重220 g~250 g,雌雄均有,用利血平0.2 mg(/kg·d-1)肌注连续14 d,第6 d加喂生理盐水3 mL(/只·d-1)造模。 [2]贺燕,鲍书哲,徐惠波. 脾虚动物模型的造模方法及其病理改变.山西中医学院学报,2008,9(1),55-57. Company Logo 肝郁模型 夹尾加肾上腺素注射法 0.3%脱氧胆酸钠水溶液和0.6%阿斯匹林水溶液隔周交替代饮水至实验结束。并取同批大鼠胃粘膜组织生理盐水溶液(30% ) ,与等量完全弗氏佐剂混合,充分乳化后,足跖部皮内注射,在实验第10、24 和48d 作免疫注射(末次注射浓度为60%, 不加弗氏佐剂) ,0.1ml/只; 造模时间35~51周。 实验第8 周开
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