克伦特罗-尿.docVIP

ICS 点击此处添加中国标准文献分类号 SB 中华人民共和国国内贸易行业标准 SB/T XXXXX—XXXX 动物尿液中盐酸克伦特罗的测定 胶体金免疫层析法 Detection of clenbuterol hydrochloride in animal urine Colloidal gold immunochromatographic method XXXX - XX - XX发布 XXXX - XX - XX实施 中华人民共和国商务部发布 前言 本标准是按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国商务部提出并归口。 本标准起草单位： 本标准主要起草人： 本标准规定了用胶体金免疫层析法检测动物尿液中盐酸克伦特罗。 本标准适用于中盐酸克伦特罗的快速检验，检测限为 3 μg/L。下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 本试验为竞争抑制法。氯金酸用还原法制成一定直径的胶体金颗粒，标记抗体。硝酸纤维素膜（NC）含有事先固定于测试区（T）的包被抗原、控制区（C）的二抗和固定于结合释放垫上的金标抗体。样品中的克伦特罗在毛细渗移的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和 T 区包被抗原的结合，使 T 区不显色，结果为阳牲；反之，T 区出现一条红色条带，结果为阴性。 GB/T 6682 二级水的规定。 胶体金免疫层析快速检测装置组成 盐酸克伦特罗包被抗原。载体蛋白与盐酸克伦特罗的偶联率为 1：9～1：18。 抗体的IC50（50%抑制率）应小于0.1 ng/mL，对其他非盐酸克伦特罗药物交叉反应率应小于20%；多抗可以由兔或羊血清获得，有效抗体含量应大于0.5 mg/mL；单抗由鼠腹水获得，有效扰体含量应大于1.0 mg/mL；抗体相对亲和力为2.51×108（结合率下降50%时，相对应的抗体浓度的例数）。 金释放垫：玻璃纤维片，免疫金释放时间小于5 min，释放效率大于80%。 NC膜：孔径为0.45 μm，4 cm毛细管时间不小于140 s。 吸水滤纸。 背板。 塑料卡盒。 离心管 塑料吸管：滴量40μL，长85 mm。 盐酸克伦特罗储备液 准确称取盐酸克伦特罗对照品适量，用甲醇溶解后稀释成1 mg/mL的储备液， -18℃冰箱中贮存备用。 阴性对照：取空白样品依法制备。 阳性对照：3 μg/L）。 仪器设备 离心机 计时器 实验步骤 样品制备 直接取尿液上清液，用于分析，若样品比较混浊时，可3000 g离心5 min或过滤。从包装袋中取出盐酸克伦特罗胶体金免疫层析快速检测装置，置于平整的台面上待测。检测装置应即开即用。用塑料吸管（4.）垂直滴加3-4滴无气泡样品上清液（约60-80 (L）于加样孔内，每批需做阴性对照和阳性对照各一孔，加样方法同样品。加样后3 min~5 min内观察结果。质控区C一条红色条带区T红色条带质控区C出现一条红色条带区T一条质控区C红色条带。质控区C未红色条带 （资料性附录）检测方法结果判定 阳性质控区（C）红色条带区（T）未红色条带性阴性 质控区（C）红色条带区（T）红色条带 阴性质控区（C）未红色条带 无效检测示意图 _________________________________ SB/T XXXX.2—XXXX I XX/T XXXXX—XXXX 3 C T C T C T C T C T