小麦谷蛋白溶胀指数微量测定方法 - 国家粮食局标准质量中心.docVIP

前 言 本标准由国家粮食局提出。 本标准由全国粮油标准化技术委员会归口。 本标准负责起草单位：河南工业大学、西北农林科技大学。 本标准主要起草人：王春、胡新中，郑建梅。 粮油检验 小麦谷蛋白溶胀指数微量测定方法 范围 本标准规定了微量方法测定小麦谷蛋白溶胀指数的术语和定义、原理、试剂、仪器、测定步骤、结果计算与表示。 本标准适用于小麦、小麦粉品质测定（适于早代育种中样品量受限制的样品）。 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。 GB 5491 粮食、油料检验 扦样、分样法 GB/T 5497 粮食、油料检验 水分测定法 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 谷蛋白溶胀指数 swelling index of glutenin（简称SIG） 在规定条件下，小麦和小麦粉在十二烷基硫酸钠（SDS）-乳酸溶液中溶胀，通过离心分离后沉淀物的质量与样品原始质量的比值，用SIG表示。 原理 小麦中的不溶性谷蛋白在表面活性剂作用下可形成溶胀的胶体絮状物，在一定条件下，沉淀的胶体和淀粉类等不溶性物质的量对样品量的质量分数（谷蛋白溶涨指数，SIG）与不溶性谷蛋白含量有关。 试剂 乳酸工作液：1份85 %的乳酸（分析纯）溶液用8份蒸馏水稀释。静置24 h后使用。 3%SDS-乳酸溶液：99 %纯度重结晶SDS 30 g，溶于970 mL蒸馏水中，再加入20 mL乳酸工作液（5.1），混合均匀后用蒸馏水定容至1000 mL。静置24h后使用。 仪器 小型实验粉碎机：样品粉碎后，细度能够通过CQ24号筛占95 %以上的粉碎机。 小型实验制粉机：样品出粉率60 ％-70 ％，细度能够全部通过CQ20号筛的实验制粉机。 天平：分度值0.0001 g。 漩涡振荡器。 适合1.5 mL离心管的恒温振荡器。推荐使用美国Brinkmann 仪器公司的Eppendorf Thermal Mixer Model 5436，也可使用其他具有同等效能的恒温振荡器［１］ 6.6 适合1.5 mL离心管的离心机。推荐使用美国Mixmicro? IEC生产的离心机，也可使用其他具有同等效能的离心机［1］ 6.7 具盖塑料离心管：1.5 mL。 6.8 可调微量移液器1.0 mL。 6.9 水流抽气泵：玻璃制或塑料制。 6.10 医用注射器针头：4号 分析步骤 试样制备 扦样与分样按GB 5491执行。 测定样品水分按GB/T 5497执行。 全麦粉样品制备 分取 200 g 小麦净样，调节小麦样品的水分至14 %。用小型实验粉碎机粉碎（6.1），过CQ24号筛。取筛下物，样品混合均匀后，放入密闭容器中备用。 小麦粉样品制备 分取 500 g 小麦净样，按小麦制粉要求，软麦样品水分调节在14%，硬麦样品水分调节在15 %。用实验室小型实验制粉机制粉（6.2），过CQ20号筛。取筛下物，样品混合均匀后，放入密闭容器中备用。 将试样和配制的试剂置于22 ℃±2 ℃的室温下直至试样和试剂的温度与室温平衡。 在22 ℃±2 ℃的室温中，准确记录1.5 mL离心管（6.7）质量（准确至0.0001 g），称取全麦粉或小麦粉试样35 mg～45 mg于离心管中，准确至0.0001 g（m1），加入0.6 mL蒸馏水，盖上离心管盖，在漩涡振荡器（6.4）上振荡5 s后，把离心管放在恒温振荡器（6.5）上，将振荡器转速调到最大转速，开始计时，水化20 min。在10 min时将离心管取出漩涡振荡5 s；20 min时漩涡振荡5 s后加入0.6 mL 3 %SDS-乳酸溶液（5.2），再漩涡振荡5 s，在恒温振荡器上溶胀20 min。每隔5 min漩涡振荡一次，每次振荡5 s。自溶胀开始后共振荡4次。 将溶胀后样品置于离心机（6.6）中，以300×g离心力离心5 min，用吸管连接水流抽气泵（6.9）吸去浮在沉淀层上的气泡和上清液；沉淀物进行二次离心，以300×g离心力离心3 min，用4号针头（6.10）连接水流抽气泵吸去沉淀表层和离心管侧壁的上清液及气泡，注意针头不能接触沉淀层。称量沉淀物质量（m2），准确至0.0001 g。 同一样品进行两次平行测定，取平均值作为测定结果。 结果计算 谷蛋白溶涨指数（SIG）（干基）按公式（1）计算： ……………………………………………………（1） 式中： X ──谷蛋白溶涨指数（SIG），以质量分数计，％（干基）； m1──全麦粉或小麦粉样品质量，单位为克（g）； m2──全麦粉或小