药品微生物检验用菌种的传代和保藏-浙江食品药品检验研究院.PDFVIP

药品微生物检验用菌种的传代和 保藏 浙江省食品药品检验所 标准菌种的概念及其管理 • 标准菌种是指由国家授权机构制备的具有 稳定的生物学特性并用妥善方法保藏的菌 种。 • 我国的标准菌种统一由中国菌种保藏管理 委员会 （CCCCM）管理，涉及药品微生物检 验的菌种由医学微生物菌种保藏管理中心 （CMCC）提供 2 标准菌种的保藏形式 我国提供的标准菌种通常是以冻干粉的形 式包装于熔封的厚玻璃容器中。在这种容 器中，微生物通常与赋形剂共存，由于缺 乏生长必须的环境条件，一般呈休眠状态。 3 4 纯培养 所谓微生物的纯培养是指在一个微 生物的菌落形成单位中，所有的微生物 细胞或孢子都属于生物学的同一个种。 严格地说，纯培养是在培养基上由一个 细胞或孢子分裂、繁殖而产生的后代。 在该细胞或孢子的生长过程种，不受其 他微生物的侵犯，不会在培养物中产生 另外微生物种的后代，在整个生长过程 中不发生变异或死亡。 5 获取纯培养的工作环境 1、洁净工作室：环境洁净度10000级下的局 部100级的单向流空气区域内，全过程必须 无菌操作，防止微生物污染。 2、无菌隔离舱 6 获取纯培养的接种工具 1、接种环 2、接种针 3、接种铲 4 、接种钩 5、其他玻璃器械 7 获取纯培养的其他器具 1、玻璃器皿：如各种规格培养皿。 2、微生物实验室常用的设备，如高压灭菌锅、 恒温培养箱等 8 获取纯培养的主要技术－移植（又称接 种） 微生物的移植（或称接种）是指将微生物 接种在培养基上的操作。 9 移植（又称接种）的两种方式－划线和 穿刺 1、划线法是指用接种工具将微生物细胞移植 在固体培养基斜面或平板上的一种方法。 2、穿刺法是指用接种工具将微生物细胞移植 到固体或半固体培养基内的一种方法。 10 验证纯培养的主要依据 1、用显微镜观察时，全部的生物个体是相似的，如 果是细菌，对革兰氏染色反应应当是一致的。 2、将培养物制成悬液，重新倾注平板，或平板划线 培养后，所形成的全部菌落的形态应该是相似的。 如果是细菌，将重新形成的菌落各作穿刺培养， 其培养特征应当是一致的。 3、从重新分离的各菌落作生理特征观测时，如对氮 源的利用，对糖类的发酵或同化以及其他生理生 化的测定，应呈现出一致性