脂质体介导外源基因体外转染牛胎儿成纤维细胞条件的优化-遗传.PDFVIP

( ) ( ) 遗 　传 HER ED I TA S Beijing 24 6 :653～655 ,2002 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　研究报告 脂质体介导外源基因体外转染 牛胎儿成纤维细胞条件的优化 李 　扬 ,吴凯峰 ,郭旭东 ,郭继彤 ,旭 日干 ( 内蒙古大学实验动物研究中心 哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室 ,呼和浩特 0 1002 1) ( ) 摘 　要 :通过脂质体 Fu GEN E - 6 介导 ,将真核表达载体 p E GFP - C1 成功导入体外培养的牛胎儿成纤维细胞 ,探 讨影响外源基因转染效率的参数 ,如 DNA 和脂质体的用量 、转染的细胞数量以及细胞暴露于 DNA 与脂质体复合 ( ) 物的时间长度 。通过实验发现 ,绿色荧光蛋白 green fluorescent protein , GFP 基因的表达随 DNA 、脂质体量的增加 而增加 ,延长细胞暴露时间反而使转染效率下降 ,转染细胞数适当才能得到较高的转化率 。 关键词 :脂质体 ;绿色荧光蛋白;牛胎儿成纤维细胞 ;转染 中图分类号 :Q253 　　　文献标识码 :A 　　　 文章编号 :0253 - 9772 (2002) 06 - 0653 - 03 Optimization of Parameters of Exogene Transfection of Bovine Fetal Fibroblasts in vit r o Mediated by Liposome L I Yang ,WU Kaifeng , GU O Xudong , GU O J itong ,BOU Shorgan ( The Research Center f or L aboratory A ni m al S cience of I n ner M ongolia University , The Key L aboratory of M i nist ry of Ed ucation of Chi na f or M am m al Rep rod uction B iology an d B iotechnology , H uhhot 0 1002 1, Chi na) Abstract :p E GFP - C1 eucaryon expression vector was successfully transfected by liposome into bovine fetal fibroblast s. We investigated t he effect of p arameter such as t he dose of DNA and liposome ,number of cell transfected and exposure time of t he cell to t he DNA - liposome complexes. It was indicated t hat GFP (green fluorescent protein) expression was enhanced as t he dose of DNA and liposome increased and on decline as t he exposure time was prolonged . The improvement of trans f