八常用药效筛选试验演示幻灯片.ppt

关于AS AS形成的主要特征之一是平滑肌细胞增生。 AS发病因素有高血压、缺氧、高胆固醇血症及血液流变学、动力学异常。 除内皮细胞核平滑肌细胞的相互作用外，血小板、白细胞、补体等也参与了AS的形成。如：高胆固醇可激活补体C5，促进白细胞和血小板在血管啊内皮细胞上聚集和粘附，致血流缓慢和通透性增高，引起血管内皮损伤，导致生长因子释放和单核细胞浸润，促平滑肌细胞增生。 血管平滑肌细胞在抗AS药物研究中的应用 正常的平滑肌细胞内丝状纤维占大部分， 引起血管收缩和舒张，称收缩型细胞。 AS病灶内的平滑肌细胞内丝状纤维 明显减少，小胞体和线粒体发达，细 胞的增殖和游走能力亢进，这种形态称合成型。 必威体育精装版研究方法：用基因工程方法对血管平滑肌细胞进行肌浆球蛋白重链基因SM1导入后，观察药物对平滑肌细胞特异性的β-半乳糖酶活性，在体内评价药物的抗AS作用。 体外，对经形体转换后的平滑肌细胞进行特异性的β -半乳糖酶活性测定，筛选药物。 通过对合成型细胞分化诱导成收缩型平滑肌细胞，抑制平滑肌细胞的增殖和游走。 开发：能使平滑肌细胞形态转换的药物。 降压实验 高血压模型 1、遗传性高血压模型：培育、自发性高血压模型SHR、SHRSP、GH、SBH、MHS等。 2、神经源性高血压模型 3、肾动脉狭窄性高血压模型（两侧） 4、妊高征模型：子宫胎盘缺血模型（孕狗腹主动脉钳夹） 5、内分泌模型：注射雄性激素14天，4毫克/天。 降压试验检测指标 血压：血压直接测定法、间接测定法（非创伤） 离体血管环灌流 心肌肥厚形态学指标观察：左心室重与体重的比值，左室壁厚度等。 心室胶原含量和浓度测定：求羟脯氨酸含量。1克羟脯氨酸相当于8.2克胶原蛋白。 循环-内分泌系统的指标：血浆降钙素基因相关肽、内皮素、心钠素 肾素-血管紧张素-醛固酮系统指标 NOS、NO 检测、血清细胞因子检测（TNF、IL-1、IL-2等） 呼吸系统实验（化痰止咳平喘药） 化痰试验：酚红排泌法 原理：酚酞和进入的OH-发生络合反应，生成有红色的物质 。用碳酸氢钠冲洗气管段，若酚红排泌多，冲洗处的液体颜色深，比色后统计吸光度的差异。 止咳实验：氨水引咳 平喘试验：支气管灌流、离体气管条 中枢神经系统药物实验（安神药、平肝熄风药） 自发活动观察：吊笼法、旷野法、活动仪 睡眠实验：观察指标有潜伏期、睡眠时间（翻正反射消失时间）、睡眠发生率 抗惊厥实验：观察指标有潜伏期、惊厥程度（半定量）、惊厥发生率、死亡率 造模物质：苯丙胺、回苏灵、戊四氮、咖啡因、烟碱等。 抗抑郁、抗躁狂：神经递质检测（NA\DA\5-HT) 缺血性心脏病药效学实验（开窍药等） 　一、药物诱发心肌缺血动物模型 二、冠状动脉阻断、缩窄性心肌缺血和心肌梗死动物模型 三、心肌缺血再灌注损伤动物模型 四、心肌缺血性心脏血流动力学动物模型 五、心肌缺血性冠脉循环动物模型六、心肌氧代谢动物模型七、体外培养心肌细胞缺血样损伤动物模型八、心肌细胞凋亡动物模型 抗应激实验（补益药） 耐缺氧：常压、低压耐缺氧 抗疲劳：游泳法、转棒仪跑步法 耐高温：计数资料 抗寒冷： 抗辐射： 益智实验（补益药） 避暗实验 ： 跳台实验： Morris水迷宫实验：定位航行实验 、空间探索实验 免疫系统实验（补益药等） 免疫器官增重：脾脏、胸腺、法氏囊（禽类特有的免疫器官） 免疫指标： 白细胞数量、吞噬功能（动物碳廓清能力、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力）、补体、溶菌酶、干扰素含量等。 肠内容物推进速度试验法 碳末推进实验（泻下药） 碳末排出时间试验（泻下或止泻） 酚红定量测定法（测定胃肠道不同部位的酚红含量，分析胃排空速度和不同肠段的推进运动功能。（对胃肠运动的影响） 胃动素、胃泌素的测定（理气药） 对胃肠运动的影响 检测小鼠胃内容物中甲基橙光密度来考察药物对小鼠胃排空机能的影响； 采用胃肠内标记物葡聚糖蓝-2000在胃内色素相对残留率及小肠推进比，观察药物对胃排空及肠推进的影响； 采用胃肠动力障碍模型，观察药物对肠蠕动减缓的拮抗效应。 体外观察药物对动物离体胃、肠平滑肌活动的影响，并可观察药物对乙酰胆碱、阿托品（M阻断）、六烃季胺（N阻断）、心得安（β阻断）、酚妥拉明（α阻断）等胃肠作用的影响，初步了解其作用机制。 芬氟拉明致胃动力障碍模型，盐酸多巴胺致胃排空延迟模型，L-Arg（左旋精氨酸）致胃动力障碍模型 胃排空实验 取24小时禁食不禁水小鼠50只，随机分组后给药，40min后将各鼠灌0.1%甲基橙0.2ml，再过20min后将小鼠脱颈椎处死。取胃置于装有5ml蒸馏水的小烧杯中，剪开胃大弯，冲冼胃内容物，