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无菌检验

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 2、 病毒类半成品: T.G G.A 25℃ 培养3-5天应无菌生长 T.G G.A 37℃ * * 2、灭活检验 (1)细菌灭活后,接种到适于本菌生长的培养基,应无菌生长。 (2)细菌毒素脱毒后接种实验动物,应正常。 (3)病毒灭活后,接种对本毒敏感的细胞、禽胚、动物,应正常。 * * (二)成品检验 1、灭活苗的检验 样品1ml /50ml T.G培养基 T.G G.A G.P(25 ℃) 培养5天,应无菌生长 T.G G.A(37℃) 培养3天后移植 * * 2、活疫苗检验 (1)细菌类制品: T.G 琼脂斜面 25℃ 培养5天应纯粹 T.G 琼脂斜面 37℃ (2)病毒类制品: T.G G.A G.P (25℃) 培养5天应无菌生长 T.G G.A (37℃) * * 3、血液制品及浑浊制品的检验 (1)加防腐剂的血液制品及混浊制品按(灭活苗检验) 方法进行。 (2)不加防腐剂的血液制品 及混浊制品按(活疫苗检验) 方法进行。 * * 4.无菌检验的有关规定: 4.1 生物制品感染了不应有的外原微生物就 是污染。 4.2 有些制品培养后出现混浊不易判定,可 移植培养1次,再判定。 4.3 如发现个别瓶有杂菌或结果可疑时,可 重检原瓶(冻干制品,重新抽样)。检 品无菌生长,判定无菌生长或纯粹,检 品有菌生长,应加倍抽检验样品重新检 验,仍有菌生长,判定不符合规定。 * * 注意事项 5.1接到样品后首先检查样品外观即包装是否破损,胶塞是否松动,瓶签是否清楚,液体苗表层是否清亮,冻干制品是否有真空。 5.2检验时选用处理过的吸管或注射器抽取样品,为防止杂菌带入样品中,一个样品用一个吸管或一个注射器,以免交叉污染。 * * 5.3 无菌室、生物洁净工作台,仅是避尘较 严密的操作室,并非完全无菌,所以在 检验样品的过程中必须注意器皿;工作 服的消毒处理,除操作人员本身洁净和 消毒外,还须注意周围环境的整净,防 止不需要的微生物侵入作业系统。 5.4 无菌检验培养基在检验的前1-2天,放 置温室进行预培养。 * * 杂菌计数 和病原性鉴定 细菌制品检测室 * * 目的及用途 用于允许含一定数量杂菌疫(菌)苗的检验鉴定。 * * 1.杂菌计数 重新抽取样品3瓶 分别做50倍稀释,移植到含4%血 清及0.1%血红素的马丁琼脂(或G.A)琼脂平板2只,37℃培养 48小时,室温24小时 计算杂菌数 数菌落数(CFU) * * 2.病原性鉴定 需氧菌的鉴定 培养物移植到马丁肉汤在37℃培养 24小时,将培养物做100×稀释,接种 18~22g小白鼠3只,每只皮下注射 0.2ml,观察10日。 * * 厌氧菌鉴定 将培养物培养时间延长到96小时,放65℃水浴30 分钟,移植到T.G或厌气肉肝汤小管, 37℃培养 24~72小时,如有菌生长,接种350~450g豚 鼠2只,肌肉注射1ml,观察10日。 * * 3.结果判定 小白鼠;豚鼠不应死亡或注射部 位化脓,如出现化脓;坏死等症 状,证明有病原菌,该批制品不 合格。 * * 4.注意事项: 如同时污染需氧菌、厌氧菌,依据两种鉴定方法同时进行。 * * 禽沙门氏菌 检验 细菌制品检测室 * * 适应于非SPF鸡胚制造疫苗的检验。 适用范围 * * 培养物 S.S琼脂或麦康凯平板2付 挑选2-3菌落 O多1因子血清做玻片凝集反应 * * O多1因子血清凝集反应 用白金耳在玻片上滴1-2滴因子 血清,再用白金耳取少量被检 物与因子血清混合,轻轻摇动 玻片,2分钟之内出现凝集反应, 判为阳性。 * * 冻干制品 剩余水分测定 细菌制品检测室 * * █ 适应范围: ? 细菌、病毒类冷冻真空 干燥的生物制品。 * * 方法 1 、真空烘干法 2 、卡氏测定法(费休氏法) * * 样品数量 每批次抽取

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