[自然科学]康为世纪microRNA及其荧光定量PCR检测讲座.pdfVIP

microRNA 及其 Real time PCR检测 北京康为世纪生物技术有限公司 北京康为世纪生物科技有限公司 康为世纪生物科技有限公司 我们的客户 我们的合作伙伴 北京大学、清华大学、 完善的产品线 一站式服务平台 复旦大学 实验设计平台 中国科学院、军事医学 分子生物学 分子生物学平台 科学院 全系列产品 301医院、协和医院、 蛋白表达与纯化 蛋白生物学产品 平台 上海瑞金医院 华大基因、诺华制药 免疫学相关产品 抗体制备纯化平台 免疫学检测平台 • 江苏泰州中国医药城 • 临床诊断试剂研发及 中试平台 • 3000平米实验室及 GMP厂房 microRNA, A hot zone of research! 2009年 2010年 microRNA microRNA （miRNA） – 长度20～24nt单链小分子RNA – 广泛存在于各种真核细胞中 – 不编码任何蛋白质 – 其基因常位于基因组非编码区 – 内源性表达，表达具时序性和组织特异性。 – 与目标基因mRNA相互作用，调控其表达水平 – 在细胞生长、发育、分化、死亡等生物过程中起着重要的作 分子功能 • ∼22 nt 单链小RNA • 与目标基因3’端非编码区的识别位点相结合 • 导致目标基因mRNA分子稳定性下降，半衰期变 短，或mRNA分子结构变化 （5‘脱帽），从而表 达水平下降 miRNA作用靶点 mRNA 5’cap 编码区 AAAAAAAA 3’ microRNA 的来源 miRNA前体与成熟体 microRNA 识别靶点– 不 严格互补配对 • 一个miRNA可调节多个 基因 • 一个基因可受多个 miRNA调控 • 60%人类蛋白基因受 miRNA调控 miRNA 与siRNA的异同 • 分子形式无区别，都是由Dicer产生的~22nt 小分子 • 分子功能近似，都导致目标基因表达水平 下降。但通常siRNA效果更剧烈 • 产生来源不同。 – miRNA有其基因，内源性表达 – siRNA多数情况下为人工外源导入 miRNA