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亲和素和生物素系统PPT

亲和免疫组织化学;亲和细胞化学不同于免疫细胞化学,亲和细胞化学是利用两种物质之间的高度亲和能力而相互结合的化学反应。 目前,亲和组织化学中的亲和物质包括亲和素与生物素、植物凝集素与糖类、葡萄球菌A 蛋白(SPA )与IgG、抗原与抗体、阳离子与阴离子、激素与维生素和脂质与受体等。;亲和素和生物素系统;生物素;亲和素;链霉亲和素;桥接亲和素-生物素法(bridged avidin biotin,BAB)  ;亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法(avidin biotin-peroxidase complex,ABC);ABC 复合物不能饱和,即亲和素上的4 个结合位点最多允许3 个位点与生物素化酶结合,留1~2 个位点与生物素化二抗结合。 抗原先后与特异性一抗、生物素化二抗、ABC 复合物结合,最终形成巨大复合体,因该复合体网络了大量酶分子,从而提高了检测的灵敏度。;标记链霉亲和素-生物素法(Labelled streptavidin biotin ,LSAB);链霉亲和素同??定浓度的生物素化酶混合后,就能形成链霉亲和素-生物素-酶复合物,这种复合物中至少存在1 个尚未被生物素占据的链霉亲和素结合位点,可以和各种生物素标记抗体结合。由于采用了改良的亲和纯化技术和酶标技术,LSAB 法敏感性更高、背景更清晰。;LSAB法优缺点;;

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