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几种微生物在培养基上的典型特征及如何辨别 微生物的典型特征及如何辨别在检测中是一个非常重要的环节，直接关系到检测结果的准确与否。 一、病源微生物的定义和分类 1、定义：病源微生物是导致人体产生不良反应和各种疾病的微生物。例如，海产品中的副溶血性弧菌导致腹泻、呕吐等；单核李斯特菌导致头昏、呕吐，儿童产生脑膜炎，孕妇产生流产，甚至导致死亡，这些微生物对人类健康都产生很大的危险性。 2、分类：从传统分类可分为：细菌、真菌和病毒 今天，着重讲述细菌的分类。细菌由于其结构简单，繁殖迅速，对人类健康的危害性大，由于其产生的变异性和耐药性，对临床 治疗产生越来越大的难度，这就要求我们必须不断地提高检测水平和检测方法。 在食品中致病细菌的分类： (1)从革兰氏染色来分： 细菌可分为革兰氏阳性菌和 革兰氏阴性菌 革兰氏阳性菌中，比较有代表性是金黄色葡萄球菌和单核李斯特氏菌。金黄色葡萄球菌革兰氏染色后，在显微镜下呈紫色的圆形菌；单核李斯特氏菌革兰氏染色后，在显微镜下呈紫色的杆形菌。 革兰氏阴性菌中，比较有代表性是大肠杆菌，革兰氏染色后，在显微镜下呈红色的小短杆形菌。 革兰氏染色的原理：革兰氏染色法是细菌学检测工作中应用最为广泛的一种染色方法。 但其原理至今尚未完全阐明。所有研究者的共同认为与下述因素有关：a)细菌细胞壁结构上的差异，革兰氏阳性菌细胞壁的结构较致密，肽聚糖层厚，含脂质少，乙醇不易透入。因此，染料和碘的复合物不易为乙醇所溶出。革兰氏阴性菌细胞壁的结构疏松，肽聚糖层薄，含大量脂质，乙醇容易透入而脱色。若革兰氏阳性菌细胞壁缺损，其染色性可变为阴性。b) 革兰氏阳性菌含有核糖核酸镁盐，易和结晶紫-碘复合物结合而不易脱色。c) 革兰氏阳性菌等电点在PH2-3，比阴性菌(PH4-5)为低，因此，阳性菌和碱性染料的结合力比阴性菌强。 (2)从形态来分，可分为： 球菌：典型的有金黄色葡萄球菌 杆菌：大肠杆菌 弧菌：霍乱弧菌 (3)从需氧和厌氧性来分： 需氧菌：大肠杆菌 兼性菌：沙门氏菌 厌氧菌：产气荚膜梭菌 二、在食品中几种常见的微生物的典型特征： 1、副溶血性弧菌的典型特征 l??样品制备按照SNO173-92、GB标准或其他标准制备 l??准备标准菌株 l?培养基： 1、30g/L氯化钠稀释液 2、60g/L氯化钠蛋白胨水(PW)3、氯化钠多粘菌素B肉汤(SPB)?4、硫代硫酸钠、柠檬酸钠、胆盐、蔗糖琼脂(TCBS) 5、氯化钠三糖铁琼脂(TSI)?6、嗜盐性试验用胰胨水(TB) 7、胰胨大豆琼脂斜面(TSA) 8、靛基质试验用培养基(I)? 9、氨基酸试验用培养基10、V-P半固体琼脂(VP)11、糖类分解试验用培养基?12、42℃生长试验用培养基13、O/F试验用培养基(HLGB)14、神奈川现象试验用我妻氏琼脂(WA) l??? 典型特征： 1)?TCBS平板上：菌落呈圆形,边缘整齐、湿润、稍混浊、半透明,多数具尖心、斗笠状,蓝绿色菌落,直径2-4mm。TCBS的质量不同的厂家差别非常大，很多由于选择厂家不当而造成分离失败。 2)? 镜检：革兰氏染色阴性，呈弧形，杆状，两端浓染 l?检测路线图： 以上生化项目中,仅有一项生化试验不符合时,按以下步骤做进一步鉴定，蔗糖分解试验,42℃生长试验,O/F试验。如仍符合副溶血性弧菌特性,可报告结果,如其中有一项不符合,即可排除。 生化项目： 4）与其它弧菌的鉴别： 结果报告 生化试验符合副溶血性弧菌特性的菌株,按增菌培养阳性管数,应用表3(3管法),查出每100g样品中的副溶血性弧菌MPN值。检验结果报告为每100g样品中副溶血性弧菌的最近似值为××个。　 　 表3　每克样品中的最近似值(3管法MPN)? 表3 几种微生物培养基 的成份及其作用 2、TCBS 酵母粉　　 5.0g　　蛋白胨 　　　 10.0g　　氯化钠 　　　 10.0g　　柠檬酸钠 　 　10.0g　　硫代硫酸钠 　 10.0g?　　胆酸钠 　3.0g　　牛胆汁粉