响应面法优化的水飞蓟子可溶性蛋白提取工艺.docVIP

响应面法优化的水飞蓟子可溶性蛋白提取工艺 　　摘要：采用单因素试验研究了提取液ｐＨ、温度、液固比和浸提时间对水飞蓟子脱脂粉末可溶性蛋白质提取率的影响。根据单因素试验结果，应用Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ中心组合试验设计原理，选取提取液ｐＨ、温度、液固比和浸提时间４个因素为自变量，以水飞蓟子脱脂粉末可溶性蛋白提取率为响应值，建立回归模型，该模型相关系数Ｒ为０．８４３ ２。响应面法优化提取工艺，得到的最佳提取条件为提取液ｐＨ 9.0，温度５０ ℃，液固比６０∶１，浸提时间９０ ｍｉｎ。在此条件下，水飞蓟子脱脂粉末可溶性蛋白质提取率达到最大预测值５７．１０％。方差分析表明，提取液ｐＨ、温度和液固比对蛋白质提取率有显著影响，而提取时间的影响不显著。验证试验进一步证实了模型和试验结果的可靠性。 　　关键词：水飞蓟子；可溶性蛋白质；提取工艺；响应面法；优化 　　中图分类号：Q949.783.5；Q946.1；R284.2 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８11420－4250-03 　　 　　Optimization of Soluble Protein Extraction from Milk Thistle Seed by Response Surface Methodology 　　 　　ＬＩＵ Ｈｅ－ｓｈｅｎｇ，ＨＵ Ｒｕｉ－ｂｉｎ，ＱＩ Ｘｉａｎｇ－ｙａｎｇ 　　 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｐＨ， ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ ｒａｔｉｏ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｏｎ ｓｏｌｕｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｄｅｆａｔｔｅｄ ｍｉｌｋ ｔｈｉｓｔｌｅ ［Ｓｉｌｙｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍ］ ｓｅｅｄ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ． Ｕｓｉｎｇ ｐＨ ， ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ， ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ ｒａｔｉｏ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ａｓ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｖａｒｉａｂｌｅｓ ａｎｄ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｓｏｌｕｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｒｏｍ ｄｅｆａｔｔｅｄ ｍｉｌｋ ｔｈｉｓｔｌｅ ｓｅｅｄ ａｓ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｖａｌｕｅ， ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｍｏｄｅｌ ｗａｓ ｂｕｉｌｔ ｔｈｒｏｕｇｈ Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ ｃｅｎｔｒａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ｄｅｓｉｇｎ， ｏｆ ｗｈｉｃｈ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｗａｓ ８４．３２％． Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｒａｆｔ， ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｐｒｏｇｎｏｓｅｄ ａｓ ５７．１０％ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｗｈｅｎ ｐＨ， ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ ｒａｔｉｏ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｗａｓ ８．９７， ５０ ℃， ６０ ｍＬ／ｇ ａｎｄ ９０ ｍｉｎ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｒｉａｎｃｅ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｐＨ， ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ ｒａｔｉｏ ｈａｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｓｏｌｕｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｗｈｉｌｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｈａｄ ｎｏｔ． Ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ ｔｅｓｔｓ ｗｅｒｅ ｅｍｐｌｏｙｅｄ ａｎｄ ｖａｌｉｄａｔｅｄ ｒｅｌｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ａｎｄ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｒｅｓｕｌｔｓ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｍｉｌｋ ｔｈｉｓｔｌｅ ｓｅｅｄ； ｓｏｌｕｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ； ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ； ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ 　　 　　水飞蓟［Ｓｉｌｙｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍＧａｅｒｔｎｅｒ］，又称乳蓟，为一年或两年生菊科草本植物，原产于地中海、欧洲西南部，在欧洲和北美已有百年的种植历史。２０世纪７０年代从德国引进后，现主要集中在我国的陕西、黑龙江、河北等地。水飞蓟是一种治疗各种肝病和心血管疾病的传统药物，其主要活性成分为黄酮类化合物――水飞蓟素，广泛应用于治疗各种肝病，例如肝炎、肝硬化、肝癌等［１－３］。此外，水飞蓟还可作为抗氧化剂、抗癌剂、消炎剂和毒蕈中毒解毒剂等［４－６］。 　　水飞蓟子除了具有很高的药用