食品中防腐剂-------苯甲酸含量的测定.pptVIP

任务1 食品中防腐剂-------苯甲酸含量的测定 思考 1. 如何测定食品中防腐剂苯甲酸的含量？ 2. 所测定产品的质量合格么？ 能力目标 能利用液相色谱法测定食品中防腐剂苯甲酸的含量； 能熟练操作及使用液相色谱仪器； 能对仪器进行保养和简单的维护； 能分析所测的色谱图数据并给出结果 知识目标 液相色谱法的基本原理 液相色谱仪基本构造及使用方法； 液相色谱法的定性分析及定量分析方法 学习情境 1.试验原理：将试样加温除去二氧化碳和乙醇，调pH至近中性，过滤后进入高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。 甲醇：经滤膜过滤（0.5微米） 稀氨水（1+1）：两者等体积混合 乙酸铵溶液（0.02mol/L）：称取1.54g的乙酸铵，加水至1000ml.溶解，经0.45微米滤膜过滤。 碳酸氢钠溶液（20g/L）:称取 2g碳酸氢钠（优级纯），加水至100ml摇匀 注：方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为蒸馏水，溶液为水溶液。 苯甲酸标准储备液：准确称取0.1000g苯甲酸，钾碳酸氢钠溶液（20g/L）5ml,加热溶解，移入100ml容量瓶中，加水定容，苯甲酸含量为1mg/mL 苯甲酸标准使用溶液：取储备液10.0ml,放入100ml容量瓶加水稀释至刻度，摇匀。经0.45微米滤膜过滤。 高效液相色谱仪；紫外检测器(FID)； 色谱柱;YWG-C18 4.6㎜×250mm； 10μm不锈钢柱 流动相：甲醇：乙酸铵溶液（0.02mol/L）(5:95) 流速：1ml/min 进样量：10μL 检测器：紫外检测器，230nm,0.2AUFS 注：根据保留时间定性，外标峰面积法定量。 汽水：称取5.00g~10.0g试样，放入小烧杯，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水（1+1）调pH约7.加水定容至10~20ml,经滤膜过滤（0.45μm） 果汁类：称取5.00～10.0g试样，用氨水（1+1）调pH约7.加水定容至适当体积，离心沉淀，上清液经滤膜过滤（0.45μm）。 配制酒类：称取10.0g试样，放入小烧杯，水浴加热除去乙醇，用氨水（1+1）调pH约7.加水定容至适当体积，经滤膜过滤（0.45μm）。 试样中苯甲酸含量（g/Kg）,按下式计算 重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10% 7．实验结果分析：判断产品质量是否合格？ 相关理论知识 一、高效液相色谱分析法（HPLC）概述 高效液相色谱还可称为高压液相色谱、高速液相色谱、高分离度液相色谱或现代液相色谱，与经典液相（柱）色谱法比较，HPLC能在短的分析时间内获得高柱效和高分离能力。 高效液相色谱分析法与气相色谱分析法一样，具有选择性高、分离效率高、灵敏度高、分析速度快的特点，但它恰好能适于分析气相色谱分析法不能分析的高沸点有机化合物、高分子和热稳定性差的化合物以及具有生物活性的物质，弥补了气相色谱分析法的不足。 高效液相色谱流程 气相色谱与高效液相色谱的比较 二、高效液相色谱的主要类型 2.固定相：与LC比，固定相粒径不同（＜10μm） 硅胶 表孔硅胶（薄壳硅胶） 全多孔硅胶 无定形 YWG 5～ 6μm 5×104 球形 YQG 3～4μm 8×108 堆积硅珠 YQG 3～4 μm 8×108 理想 原理：吸附 特点：峰易拖尾 高分子多孔小球：YSG 特点：柱选择性好，峰形好，柱效低 适用：分离弱极性化合物 3. 流动相：底剂（烷烃）+ 有机极性调节剂 例： 正己烷或庚烷 + 氯仿- - - 4. 影响k的因素：与固定相性质和流动相性质有关 溶质分子极性↑，洗脱能力↓，k↑，tR↑ 溶剂系统极性↑，洗脱能力↑，k↓， tR↓ 注：调节溶剂极性，可以控制组分的保留时间 5. 出柱顺序：强极性组分后出柱，弱极性组分先出柱 （二）.液液分配色谱法（LLC） 1.分离原理：利用组分在两相中溶解度