逐瘀止痛方对痛经大鼠血液流变学及子宫组织NO、ET含量影响的实验研究.docVIP

精品论文 参考文献 逐瘀止痛方对痛经大鼠血液流变学及子宫组织NO、ET含量影响的实验研究 任瑞芳 史淑霞 李彩娣 路彬 宋巧 邵怡霞 　　甘肃医学院 744000 　　【摘要】目的：探讨逐瘀止痛方治疗痛经的作用机理。方法：采用缩宫素腹腔注射形成大鼠痛经模型，检测各组大鼠扭体反应发生次数，子宫组织匀浆NO、ET含量，血液流变学指标。结果：逐瘀止痛方能减少痛经大鼠扭体反应发生次数，调节大鼠子宫组织NO、ET含量，改善大鼠血液流变性，显著降低全血粘度、血浆粘度、红细胞压积。结论：逐瘀止痛方具有确切的治疗痛经的疗效，其作用途径与调节子宫组织NO、ET含量，改善血液流变性有关。 　　【关键词】痛经；逐瘀止痛方；NO；ET；血液流变学 　　 　　痛经是妇科临床发现，痛经以血瘀证型最为多见[1]，胞宫气血运行不畅，不通则痛。临床常见疾病，严重影响妇女的生活、工作。逐瘀止痛方是我们自拟治疗痛经的方剂，经过多年临床实践，化瘀止痛效果显著，临床常用于治疗血瘀型痛经。为了使临床治疗具有科学的理论依据，我们设计了本动物实验研究，通过检测子宫组织匀浆NO、ET含量，血液流变学指标，揭示逐瘀止痛方治疗痛经的作用机制。现报道如下： 　　1 实验材料 　　1.1 药物 　　逐瘀止痛方：由桃仁、当归、白芍、五灵脂、泽兰、香附、元胡、鸡血藤、川芎、肉桂组成；月月舒痛经宝颗粒：河南省宛西制药股份有限公司生产；己烯雌酚注射液：广州白云山明兴制药有限公司生产；缩宫素注射液：甘肃大得利制药有限公司生产。ET试剂盒、NO试剂盒、考马斯亮兰蛋白试剂盒：均由南京建成生物工程研究所提供。 　　1.2 动物 　　健康雌性SD大鼠48只，体重180-220g，由甘肃中医药大学动物实验中心提供。 　　1.3 仪器 　　数码恒温水浴锅,电动离心机,电子分析天平,血流变测试仪,放射免疫gamma;计数器,分光光度计；可控低温冰箱。 　　1.4 统计学处理　 　　SPSS13.0软件。实验数据以均数plusmn;标准差( plusmn;s)表示，采用单因素方差分析。 　　2 方法与结果 　　2.1 实验方法 　　健康雌性SD大鼠48只，体重180-220g，按随机数字表法分成6组，每组8只，分别为空白组、模型组、月月舒对照组、逐瘀止痛方高、中、低剂量组。参照文献[2]中的大鼠痛经经典模型制作。实验过程中，所有大鼠自由饮水摄食。各组大鼠适应性饲养1w后，除空白组外，其余各组连续腹腔注射己烯雌酚10d，以提高子宫对缩宫素的敏感性，每d 1次，第1d和第10d为0.5mg/只，第2d至第9d为0.2mg/只。于腹腔注射己烯雌酚的第5d起各组开始给药，每d灌胃1次，连续6d。其中空白组、模型组灌胃相应体积冷开水；月月舒对照组每d 2.8g/kg；逐瘀止痛方高剂量组每d 35g/kg；逐瘀止痛方中剂量组每d 17.5g/kg；逐瘀止痛方低剂量组每d 8.75g/kg。末次给己烯雌酚24h后，再次各组分别用实验药物，45min后腹腔注射缩宫素2u/只，观察30min内发生扭体反应的大鼠数目及扭体反应发生次数。扭体反应以大鼠腹部收缩内凹，躯干与后肢伸展，臀部与一侧肢体内旋为标准。给予缩宫素1h后，大鼠腹腔注射2%戊巴比妥钠(0.23ml/100g)麻醉，颈部切口，分离颈总动脉，插管取血5ml置肝素钠抗凝管中摇匀，检测血液流变学指标（全血粘度、血浆粘度、红细胞压积）。剖腹，取出子宫，按NO及ET试剂盒要求剪取重0.04g、0.1g的子宫各1块以冰盐水(内含20mmol/L EDTA)洗净后，再以冰盐水在冰浴下制成10%的子宫组织匀浆,以3000r/min低温离心15min后，取上清液-70℃保存待测。NO含量测定采用硝酸还原酶法；ET含量测定采用放射免疫法。 　　2.2 实验结果 　　2.2.1 一般状态 　　空白组、月月舒组及逐瘀止痛方各剂量组一般状况良好，耳色红润，精神正常，活动灵敏，未见明显异常；模型组大鼠精神亢奋，易激惹，呈烦躁状。 　　2.2.2 大鼠扭体反应发生次数及扭体发生率　见表1。 　　 　　 　　注：与模型组比较，*Plt;0.05,**Plt;0.01；与月月舒组比较，#Plt;0.01 　　表3显示，大鼠的血液流变学指标，各用药组与模型组比较，差异具有显著性意义(Plt;0.05，Plt;0.01)。与月月舒组比较，逐瘀止痛方三个剂量组全血低切粘度值明显降低，差异具有显著性意义(Plt;0.01)。提示：逐瘀止痛方活血化瘀的作用优于月月舒。 　　3 讨论 　　痛经的发生是由于气血运行不畅，胞宫经血流通受阻，以致不通则痛。西医学认为痛经是由于子宫平滑肌异常痉挛收缩导致。逐瘀止痛方由桃仁、当归、白芍、五灵脂、泽兰、香附、元胡、鸡血藤、川芎、肉桂组成。活血化瘀