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霉菌的制片与染色
实验六 霉菌的制片和简单染色;学习并掌握观察霉菌形态的基本方法; 初步了解霉菌的形态特征; 学习并掌握霉菌的制片和简单染色基本技术。;1、霉菌:呈菌线体形态,但霉菌的菌丝和孢子比放线菌的粗得多。霉菌的菌落形态较大,质地疏松,外观干燥,不透明,菌落与培养基间连接紧密,不易挑取,菌落正反面,边缘与中心的颜色、构造通常不一致,有霉味。菌丝的孢子较大,在低倍镜下即可清晰观察到有隔或无隔菌丝和孢子及巨大的孢子囊;;;1、菌种:毛霉48h马铃薯琼脂平板培养物、 黑曲霉48h马铃薯琼脂平板培养物 2、溶液试剂:乳酸石炭酸棉蓝溶液 3、仪器及其他用品:酒精灯、镊子、载玻片、盖玻片、解剖针、显微镜、50%乙醇。;1、直接制片观察 (1)在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液。 (2)用镊子从生长有霉菌的斜面挑取霉菌菌丝 (3)用50%的乙醇浸??,洗去脱落孢子再用蒸馏水将浸过的菌丝洗一下 (4)放入载玻片上的液滴中,仔细地用解剖针将菌丝分散开来。 (5)盖上盖玻片(勿使产生气泡,且不要再移动盖玻片)。 (6)镜检:先用低倍镜。再转换高倍镜镜检并记录观察结果;2、透明胶带法: (1)、在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液 (2)、食指与拇指黏在一段透明胶带两端,使胶带呈U形,胶面朝下 (3)、胶面轻触霉菌表面 (4)、将黏在胶面的菌体浸入载玻片上的乳酸石炭酸棉蓝染色液中,并将胶带两端固定在载玻片两端 (5)、低倍镜、高倍镜镜检;注意取菌时,镊子取菌、解剖针挑取少量菌丝时,尽量减少菌丝断裂及形态破坏; 盖盖玻片勿使产生气泡,且不要再移动盖玻片; 尽可能将菌丝分开,以免菌丝太厚,不易于显微镜观察;加盖玻片时勿压入气泡,以免影响观察; 注意无菌操作,且挑取菌丝前镊子和接种环要在酒精灯上灼烧灭菌 ;; That’s all Thanks
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