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第二十章 健康相关产品的 免疫学检验 前言 健康相关产品： 是指保健食品、化妆品、涉及饮用水卫生安全产品、消毒产品等与人体健康密切相关的产品。 第一节 有毒有害物质的免疫学检验 一、免疫学技术在环境中有毒有害物质检测中的应用 检测奶、肉、蛋、肝、蔬菜水果等食品中残留的农药（杀虫剂、除草剂）、残留的抗生素。 检测水和土壤中残留的农药。 水中藻毒素。 谷物及其制品中的霉菌毒素。 保健功能食品中的激素、毒品、兴奋剂等。 国外已有多种检测试剂盒应用，抗体多为单克隆抗体，而且把免疫学技术与自动化分析仪器相结合，如免疫亲和柱、高效液相色谱法、免疫亲和柱－荧光分光光度法。 二、有毒有害物质免疫学检测方法 （一） RIA法（放射免疫分析） 应用：环境样品中的杀虫剂、除草剂、激素 的测定。 缺点：放射元素的污染，特殊的分析仪器。 二、有毒有害物质免疫学检测方法 （二）ELISA法 应用最多的技术类型，是竞争抑制法。 ELISA主要用于食品中残留农药、抗生素、激素的检测。谷物中真菌毒素的检测和水中藻毒素的检测。 二、有毒有害物质免疫学检测方法 （三） 酶增强免疫测定技术（enzyme-multiplied immunoassay technique，EMIT） 用途：用于半抗原或小分子抗原的检测。 原理：将这类抗原接合在酶分子活性点附近，如与相应抗体结合则封闭了该活性点位，使酶失活，测定时将待测样品、酶标抗原（半抗原）、特异性抗体一起混合，加酶底物，测定反应体系中酶的活性。由于样品中待测抗原与酶标记抗原竞争结合反应体系中限量的抗体，从而使游离酶标抗原量增多，最终测得的酶活性随着反应体系中未标记待测抗原的浓度升高而增强。 二、有毒有害物质免疫学检测方法 （四）斑点金免疫层析试验（dot immunogold chromatographic assay, DICA） 是胶体金标记技术和蛋白质层析技术相结合的以微孔滤膜为载体的快速定性或半定量筛查试验。 应用：毒品、霉菌毒素的检测等。 二、有毒有害物质免疫学检测方法 （五）免疫磁珠 用于定量、半定量检测环境中残留的农药。 三、有毒有害物质免疫学检测的应用 (一)残留农药的检测 1. ELISA法 应用：检测食品、土壤、水中残留的有机氯、有机磷、甲苯胺、滴灭威、多菌灵、百草枯、拟除虫菊酯，三嗪类等杀虫剂、除草剂等。 优点：比用气相色谱或高效液相色谱方法所用的试剂费要低20倍，对样品的处理方法也比较简单，且两者的最低检出限及回收率均吻合。 三、有毒有害物质免疫学检测的应用 (一)残留农药的检测 2. 金免疫层析法 已有对有机磷（甲基对硫磷、乙基对硫磷）、杀螟硫磷、毒死蜱、呋喃丹等农药检测的商品胶体金试剂盒。 (二)真菌毒素的检测 1．黄曲霉毒素的检测 （1）ELISA法 主要适用于大批量样品的定性、定量分析，与常规标准方法符合率较高。缺点是只能检测一种毒素。 （2）金标记试纸法 非常适于现场检测和大量样品初筛。 (二)真菌毒素的检测 1．黄曲霉毒素的检测 （3）免疫亲和柱的应用 黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1单克隆抗体免疫亲和柱均已商品化，用于各种食品、饲料和体液样品纯化、浓缩，为进一步的仪器定量检测奠定了基础。 (二)真菌毒素的检测 2．玉米赤霉烯酮 （ZEN） 小麦中玉米赤霉烯酮ELISA检测已纳入国家标准方法（GT/T14933-94）。 有高灵敏度的ELISA试剂盒商品提供。 商品玉米赤霉烯酮免疫亲和柱，与荧光计相连接可检测饲料中的玉米赤霉烯酮检测范围为10－200ng/g。检出限为4ng/g，总回收率为94％，检测结果与HPLC法吻合。 (二)真菌毒素的检测 3．脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON） 我国已把小麦、面粉、玉米粉中DON的ELISA检测和TCL纳入限量标准制定的检测方法。 现有高灵敏度的ELISA检测DON试剂盒商品。 DONtest免疫亲和柱已有商品供应，可与色谱法结合应用。 （三）人工合成有毒污染物的检测 1．二噁英的检测 双抗体放射免疫分析 ELISA法定量检测 2．多氯联苯的检测 ELISA试剂盒 用PCB3多克隆抗体包被磁珠，用于定性、半定量、定量检测土壤、水、沉淀物、鱼浆中的PCB3，检测范围为0.25～25.0ppb。 第二节 化妆品的免疫学检验 第三节 保健食品免疫学检验和评价 前言 为了规定评价保健食品功能的统一程序和试验规程，卫生部于2003年2月颁发了保健食品检验与评价技术规范，在确定的检验机构对其功能学评价方法和试验结果