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胶原交联 正常角膜板层结构 圆锥角膜 胶原交联化学结构图 胶原交联示意图 C3R/CXL-角膜胶原交联 光敏剂：核黄素（吸收峰365-370nm） 光源：365nm紫外光 能量：３mW/cm2 照射时间：30min 核黄素滴眼 紫外光照射 1 增加组织生物硬度2 蛋白变化 - 核心蛋白聚糖和肌动蛋白增高  - 胶原蛋白中干分子聚合蛋白增加 3 抗酶解能力增高 Collagen Fiber Diameter in the Rabbit Cornea After Collagen Crosslinking by Riboflavin/UVAGregor Wollensak, MD,*Cornea ? Volume 23, Number 5, July 2004 PDT效应 角膜胶原直径增加 9.3% (3.1 nm). 基质细胞数量改变 上皮下神经丛改变 内皮细胞正常 疗效: 最佳矫正视力: 提高3.6行 地形图: 平均K值减少2.1D 屈光度减轻 散光度减轻 Corneal crosslinking with riboflavin and UVA for the treatment of keratoconus. Kymionis G, Portaliou D. J Cataract Refract Surg. 2007 Jul;33(7):1143-4; author reply 1144. J Cataract Refract Surg. 2006 May;32(5):837-45. 核黄素双重作用-光敏剂 紫外光吸收 病原体灭活与角膜感染的治疗 单纯疱疹病毒 细菌 真菌 阿米巴 真菌性角膜炎 致病菌:念珠菌 光敏剂： 1 mM 酞菁 激光：　675nm 体外实验有效 Feasibilities of photodynamic therapy in the treatment of corneal mycotic lesions: an experimental study. Vestn Oftalmol. 2007 Sep-Oct;123(5):25-8. Mamikonian VR, Balaian ML CXL治疗感染性角膜炎 利用CXL治疗了5例感染性角膜炎并有角膜融解的患者 患者对全身和局部抗菌药效果不佳 随访1-9个月 所有患者角膜病变得到控制 （苏黎世大学报道） Iseli, Hans Peter MD CORNEA Volume 27(5),?June 2008,?pp 590-594 阿米巴性角膜炎 滋养体 包囊 光敏剂：竹红菌乙素（Hypocrellins B，HB） 我国自主研发的第二代新型光敏剂 竹红菌素参数： 　主吸收467nm；脂溶性 吸收谱 由中国科学院化学所提供 天然色素　易纯化　光毒性高　暗毒性低　排出速度快 HB与卟啉及酞菁类光敏剂不同 - 自由基机制（Ⅰ型反应机制） - 单重态氧机制（Ⅱ型反应机制) - 半醌负离子自由基和半醌正离子自由基 HB-PDT主要作用　　细胞膜结构 　　　　　　　　　直接损伤DNA 带有冷却避光装置的450W钠灯 通过滤光片　470nm 照射距离　15cm 功率密度　50mW/cm2 照射时间　30min 光源 　　　　 由中国科学院化学所提供 HB在体外与阿米巴滋养体和包囊结合性 HB-PDT对阿米巴滋养体和包囊杀伤作用 HB-PDT对兔角膜上皮和基质细胞的毒性作用 观察内容 HB结合性观察 1000X 对阿米巴杀伤作用观察 荧光法 滋养体 IC50=0.23μg/ml 包囊 IC50=3.8μg/ml 滋养体 包囊 NNA-E. COLI培养法 滋养体 HB 1μg/ml 生长(-) HB 0.0625, 0.125, 0.25, 0.5 μg/ml 生长(+) 　 对照组 生长(+) 包 囊 HB 20μg/ml 生长(-) HB 0.625，1.25，2.5，5，10μg/ml 生长(+) 对照组 生长(+) 对阿米巴杀伤作用观察 对兔角膜上皮和基质细胞毒性作用 上皮细胞 基质细胞 ≥