培训内容 Quattro micro.pptVIP

Quattro LC/Micro液质联用培训讲义 内容 仪器质量校正 定性实验 调谐仪器 定量实验 维护及故障排除 常用备件号 仪器质量校正 1. 注射泵注入校正溶液，以碘化钠铯（异丙醇/水 = 1：1, NaI 2ug/L , CsI 50ng/L）溶液为例，流速5ul/min 在质谱调机页面（MS Tune）监看四个扫描质量： 172.9 ,622.6 ,1072.2 , 1971.6 仪器质量校正 仪器质量校正 ESI +参数设置(参数设置确保校正样品最大质谱信号响应) 仪器质量校正 LM Resolution 1（15.0） HM Resolution 1（15.0） Ion Energy 1（0.5） Entrance（50） Collision（2） Exit（50） LM Resolution 2（15.0） HM Resolution 2（15.0） Ion Energy 2（0.5） 此为第一段和第二段扫描模式参数。这是因为在进行质量校正的时候必须同时校正两个质量分析器的三种模式（静态扫描、动态扫描、扫描速率补偿）的缘故。 仪器质量校正 仪器质量校正 3. 在质谱调机页面（MS Tune）选择校正仪器以开启的质量校正页面。 仪器质量校正 4. 开启质量校正页面后，质量校正前请先确定目前仪器处于未校正的状态，所有六种校正都为未校正（No Calibration），若不然则开启一个未校正（Uncal.cal）的档案。 仪器质量校正 5. 从下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯，从下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯校正质量范围两千以内可选择 Naics2 。确认后按开始键。 仪器质量校正 6. 按开始键后会跳出自动校正选单 请勾选所有种类（Type） 处理程序部分选择讯号采集和校正（Acquire Calibrate），可勾选打印报告（Print Report） 勾选完成后点压采集参数 （Acquisition Parameters） ！注意，在设定采集参数前请不要按OK键。 仪器质量校正 static calibration静态精确校正:使四极杆质量分析器准确地‘停’在指定的质荷比上 (如： Tuning， SIR ，MRM)。 scanning calibration 扫描校正:能确保所采集到的质谱峰进行准确质量测量 (如在全扫描方式) scan speed compensation扫描速度补偿: 当仪器进行快速扫描时，对系统进行‘延时’补偿校正。 仪器质量校正 7. 设定采集参数： 选择适当的校正质量范围，校正大范围的全质量从22校正到2000，其余的参数可以使用预设参数default即可，设定完后按OK键。 仪器质量校正 8. 按OK键后会跳出步骤6的自动校正选单，此时按此页面OK键就会开始进行质量校正。 9. 当所有的校正都完成后，将校正的结果储存起来，从质量校正页面的档案（File）选取另存新档（Save As）。输入所欲储存之文件名称后按OK即可。 仪器质量校正 仪器质量校正 10. 输入所欲储存之文件名称后按存盘即可，确认所有的扫描模式都已经被校正。 仪器质量校正 11. 根据实验要求，分别按上述步骤实验LM/HM=15，LM/HM=14，LM/HM=13三条校正曲线。 定性实验 调谐仪器 1．全扫描 full scan 定性实验 调谐仪器 样品： 利血平标样,调谐最佳实验锥孔cone voltage(CV)、毛细管电压、RF lens、离子能量等参数，进行全扫描获最大分子离子峰609。 样品：利血平1ppm (乙腈：水=1:1配置) ESI + scan :609 (CV=45) 定性实验 调谐仪器 定性实验 调谐仪器 2．子离子扫描 daughter scan 定性实验 调谐仪器 碰撞压力 3×10-3mbar 定性实验 调谐仪器 定性实验 调谐仪器 3. 多反应监控MRM 定性实验 调谐仪器 样品1．利血平标样1ppm, 根据全扫描获得最佳实验锥孔（CV），调谐特定碎片最佳实验碰撞能量（CE），进行多反应监控MRM实验准备 ESI + MRM :609 /195(CV=45,CE=55) 定性实验 调谐仪器 4．母离子扫描 定性实验 调谐仪器 定性实验 调谐仪器 定性实验 调谐仪器 常见17种混合氨基酸m/z M+H+ 天门冬氨酸(Asp或D) 134 丝氨酸(Ser或S)