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标记免疫对临床的新贡献 放射免疫的创立 1959 美国Yalow Berson 1960 英国 Ekim’s 1977 获诺贝尔医学生物学奖 放射免疫面临的挑战 半衰期短，限制了药盒使用寿命 由于标记物的不断变化，带来药盒批间、批内较大的差异，标准曲线无法保存备用 反应时间过长(数小时至过夜) 结果测量依靠时间累计，至少每一样品一分钟 新技术的挑战 标记免疫方法 化学发光免疫分析仪 不同系统的理论灵敏度 比色法：10-10 mole RIA：10-11 to 10-12 mole 荧光法：10-12 mole 发光法：10-15 mole DELFIA： 10-18 mole 自动标记免疫分析的优点 消除手工操作的误差 灵敏度高，稳定性好 速度快、当天报告 特殊项目的测定 3rd-TSH、intact-HCG、F-PSA…… 甲状腺功能测定战略 60年代 基础代谢 (BMR) 蛋白结合碘(PBI) 70年代 T3，T4 TSH 吸131I试验 80年代 超敏TSH FT3，FT4 两次战略转移 第三代超敏TSH 甲状腺功能诊断新战略 (Caldwell 1985) 整分子HCG HCG分子结构 裂口HCG和片段的代谢 唐氏综合征的三联筛查 Prenatal Screening for Down’s Syndrome 为什么要筛查唐氏征 AFP、HCG、uE3三联筛查的结果运算 恶性肿瘤的实验室诊断 总PSA和游离PSA 心肌标志物 AMI - WHO Criteria Acute myocardial infarction (AMI): WHO定义------- 存在下述三个指标中的两个: ECG 改变 典型胸痛 心肌酶谱升高 AMI: New Criteria（美国临床生化科学院NACB） 原有 MI 定义: WHO (2 out of 3 criteria) 但是: 目前临床实践 流行病学研究以及临床试验 新的手段: 血清生化标志物的敏感度和特异性 and 精确的成像技术 一致通过: “MI 重新定义” “MI 的诊断：临床局部缺血状态敏感和特异的生化标志物如心肌钙蛋白以及CKMB的血液水平升高 “ECG 变化如ST段升高、降低，T波倒置，可以反映心肌缺血，但并不足以定义MI。最终的诊断取决于心肌生化标志物的水平升高。 蛋白标志物的动力学曲线 ACCESS测定的Accu Tni FDA唯一批准（2003年）用于心血管危险性分层的肌钙蛋白测定。 欧洲血管协会（ESC）和美国心血管学院（ACC）推荐的新的肌钙蛋白标准，心肌梗塞的首选标志物。 建议的ACS诊断程序和危险度分层 Outcome studies Follow patients after Initial presentation With chest pain 乙肝蛋白标志检测 新波公司生产的时间分辨荧光分析系统 时间分辨荧光免疫原理图（Time-resolved Fluorescence Immunoassay） 时间分辨: 通过时间延迟，待非特异性荧光完全衰减后再在固定时间段检测特异性荧光，就消除了自然本底的影响，零本底测量，提高了检测的灵敏度。 表面抗原 表面抗体 e抗原 e抗体 核心抗体 时间分辨技术为临床检测带来的先进性 波长分辨：1.激发光波谱宽、荧光发射波谱窄，有利于增强荧光的强度； 2.激发光和发射光之间存在较大的STOKES位移，有利于排除非特异性荧光的干扰、提高光谱的分辨率。 ０本底、高特异性 特异性荧光与非特异性荧光分离 发射荧光与激发荧光分离 时间分辨 光谱分辨 同一体系可同时测多个项目 单，双，三，四标记 多标记 高稳定性，高精确度 试剂保质期至少一年 标准曲线保留时间长 同一批次只需两点定标 标记位点多，可达20个 对标记物结构及活性影响小 无衰变 受环境影响小 原子标记 线性范围更宽 重复性更好 稳定的荧光螯合物 荧光强度大大提高 解离-增强 检验先进性 特点 技术 谢 谢 其本质是蛋白、多肽、酶和激素，除AFP能用作早期诊断外（因肝脏是血池）， I期肿瘤阳性检测率一般都低于20% 。 临床：病史、体征 物理检查：X光、CT、磁共振、B超、红外、 核医学 术前：穿刺、刮片、拉网 术后：组织切片 免疫：肿瘤抗原和代谢物测定 分子生物：核酸分析 肿 瘤 诊 断 辅助 病理 已