禽源大肠杆菌对喹诺酮类药物耐药性分析.docVIP

精品论文 参考文献 禽源大肠杆菌对喹诺酮类药物耐药性分析 傅 莲（苏州大学附属第一医院 江苏苏州 215006 ） 　　【摘 要】从我国江苏等14个省、市临诊上具有典型大肠杆菌病的病、死家禽中分离到大肠杆菌361株，通过玻板凝集和试管凝集试验测定分离株血清型；从上世纪90年代起禽源大肠杆菌对喹诺酮类部分抗生素耐药性已经较强，近20年来大肠杆菌分离株对大部分喹诺酮类抗生素耐药性都提高了两倍以上；结果显示，由于我国在畜禽上抗生素的大量使用或滥用，我国禽源大肠杆菌对喹诺酮类药物的耐药性不断增强。 　　【关键词】大肠杆菌喹诺酮耐药性 　　大肠杆菌属于革兰氏阴性菌中最易产生耐药性的细菌之一，并且耐药菌株的数量和耐药强度不断增加。氟喹诺酮类药物是治疗尿道感染的最主要抗菌药物之一。喹诺酮类药物具有抗菌谱广、抗菌力强、结构简单、给药方便、与其它常用抗菌药物交叉耐药性低、性价比高等优势，因而愈来愈受到各国的重视，成为竞相生产和应用的热点药品。本试验选择我国20世纪90年代以来分离的361株禽源大肠杆菌，进行5种1-4代喹诺酮类药物敏感性试验，了解我国禽源大肠杆菌对喹诺酮类抗生素药物的耐药情况。 1实验与方法 　　1.1材料 　　1.1.1受试菌株 　　2003～2012年从全国14个省（市）收集具有大肠杆菌病病变的禽肝脏、脾脏、卵巢等病料。 　　1.1.2培养条件 　　大肠杆菌病料直接划线接种于麦康凯平板，37℃培养18h；挑取典型菌落在麦康凯平板上分区划线，37℃培养18h后挑取单个典型菌落纯培养后冻干保存。 　　1.2药品及试剂 　　5种抗生素及抗生素药敏纸片：第一代：萘啶酸；第二代：吡哌酸；第三代：诺氟沙星，氧氟沙星；第四代：加替沙星。 　　亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液、麦康凯干粉培养基、水解酪蛋白琼脂（MH）、营养肉汤、肠杆菌科细菌生化编码微量鉴定管等试剂为杭州微生物试剂有限公司产品。 　　1.3细菌生化试验和血清型鉴定 　　取分离的细菌分别接种三糖铁琼脂斜面，37℃培养24～48h后观察斜面和底部颜色变化以及产气情况，按文献报道方法对所有分离株进行葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、侧金盏花醇、吲哚、M.R、V-P、枸橼酸盐10项生化指标的测定。 　　1.4药敏纸片试验 　　按CLSI推荐的Kirby-Bauer法进行。从培养了16-24h的LuriaBertani（LB）琼脂平板上，挑取单个菌落，直接用生理盐水制成0.5麦氏单位。在15min内，用无菌棉拭子蘸取调好的菌液，在MH培养基表面涂布接种，将确定好的药敏纸片分贴到平板表面。37℃培养18～20h后，测量各药敏纸片抑菌圈直径。 2结果 　　2.1血清型鉴定 　　通过玻板凝集和试管凝集试验，测定出361株禽源大肠杆菌分离株的血清型：361株大肠杆菌分离株覆盖了42个血清型，其中O78、O2、O1和O18血清型菌株分别有143、47、27和22株，共239株，占定型菌株的66.20%。 　　2.2大肠杆菌药敏纸片试验结果 　　在1-4代5种喹诺酮类药物中，大肠杆菌对第一代喹诺酮类药物萘啶酸的耐药率最高（77.56%），对第四代喹诺酮类药物耐药率最低（22.44%）。细菌对第二、三代喹诺酮类药物的耐药率为41.00%～59.28%，见表1-1。 表1-1禽源大肠杆菌药敏纸片试验结果 　　1996～2004年大肠杆菌分离株耐药率超过60%的仅有萘啶酸（63.48%），对其余4种药物耐药率均低于50%；2004～2012年大肠杆菌分离株对加替沙星耐药率最低（32.24%），其余均在60%以上，对萘啶酸的耐药率最高，2004年后大肠杆菌分离株对抗生素的耐药率都远高于04年之前。 3.讨论 　　大肠杆菌是一种临床感染常见的条件致病菌。近年来，随着喹诺酮类药物的大量使用甚至滥用，大肠杆菌对喹诺酮类药物耐药率不断上升。本试验结果显示，从上世纪90年代起禽源大肠杆菌对喹诺酮类部分抗生素耐药性已经较强，近20年来大肠杆菌分离株对大部分喹诺酮类抗生素耐药性都提高了两倍以上。不同血清型的大肠杆菌对喹诺酮类药物的耐药性存在一定的差别，如在O1、O2、O18和O78四个禽源大肠杆菌常见血清型分离株中，O78血清型分离株对4种抗生素的耐药率超过50%，O18血清型分离株对3种抗生素的耐药率超过50%，O1、O2血清型分离株仅对2种抗生素的耐药率超过50%，但其差异不显著。结果显示，由于我国在畜禽上抗生素的大量使用或滥用，近20年来，在抗生素的选择性压力下，我国禽源大肠杆菌对喹诺酮类药物的耐药性不断增强，交叉耐药情况亦越来越严重，已成为严重的公共卫生问题。对细菌耐药性进行监控与分析，将对兽医临床用药具有重要的指导意义。 参考文献 [