贝类中3种组织血型抗原ELISA检测方法的建立与分型研究.pdf

中国水产科学 2013年 1月，20(1)：211-216 JournalofFisherySciencesofChina 研究简报 DoI：10．3724／SP．J．1118．2013．00211 贝类中3种组织血型抗原ELISA检测方法的建立与分型 刘帅帅 ，姚琳 ，马丽萍 ，周德庆 ，赵峰 1．中国水产科学研究院 黄海水产研究所，山东 青岛 266071 2．中国海洋大学 食品科学与工程学院，山东 青岛 266003 摘要：人类组织血型抗原(histo．bloodgroupantigens，HBGAs)是诺如病毒 (NoVs)的结合受体，本研究假设贝类 中也 存在类似的HBGAs并且特异性地富集 NoVs，利用 HBGAs单克隆抗体，建立贝类中3种HBGAs的ELISA检测方 法，分析牡蛎 (Crassostreagigas)、缢蛏(Sinonovaculaconstricta)、菲律宾蛤仔 uditapesphilippinarum)、紫贻贝 (Mytilusgalloprovincialis)、毛蚶(Scapharcasubcrenata)、栉孔扇贝(Chlamysfarreri)等 6种双壳贝类中HBGAs的类 型。结果显示，在上述 6种贝类 中都检测出A型抗原，其 中菲律宾蛤仔的检出率为 11．6％(9／77)，紫贻贝的检出率 为 28．1％(16／57)，缢蛏样品为 72．3％(476／5)，栉孔扇贝为 84．6％(58／69)，其余贝类检出率为 1o0％；只有牡蛎样品检 出 H 抗原，检出率为 30．7％(28／91)；在缢蛏和毛蚶样品中检测出 B 型抗原，检出率分别为 76．9％(50／65)和 77．8(56／72)。结果表明贝类 中存在不止 1种类型的HBGAs。 关键词：贝类；组织血型抗原；诺如病毒；酶联免疫吸附；单克隆抗体 中图分类号：$944 文献标志码：A 文章编号：1005—8737一(2013)01—0211-06 诺如病毒(noroviruses，NoVs)属于杯状病毒科 黏膜上皮细胞表面，同时也以游离低聚糖形式存 (Caliciviridae)，是非细菌性急性肠 胃炎的主要病 在于唾液、肠 内容物、乳汁及血液等体液中，具 原体，是一种重要的食源性病毒。NoVs分为 5个 有细胞表面受体 、信号传导因子或离子转运通道 遗传组(GGI-V)，其中GGI、GGII和 GGIV型可 的功能 J。ABO血型系统(包括A、B和H抗原)、 以感染人 l【】。在由食物污染造成的病毒性胃肠炎流 Lewis血型系统(包括 Le、Le、Le、Le等抗原) 行中，90％的病原是NoVsJ。20世纪 70年代有人 和分泌型(secretor)是 3种主要的人体 HBGAs。 假设，NoVs的感染与宿主的某种遗传因素有关L3J。 流行病学调查显示，牡蛎等双壳贝类是 NoVs 最近的研究表 明，人类组织血型抗原(histo．blood 食物性传播最主要的载体之一。贝类滤食水中微 groupantigens，HBGAs)作为病毒受体介导了NoVs 藻的同时，消化道可大量富集NoVs。贝类的这种 感染人类的过程 4【]。对 NoVs感染者和志愿者的 富集作用导致其内脏团内的病毒浓度可以高出周 回顾性调查发现，病毒的感染和人的 HBGAs有 围环境几十倍甚至上千倍 l【…。Cheng等[1l】用 RT． 着很大的相关性，O型血的人比A、B型血的人更 PCR的方法检测了 11个国家的 507份牡蛎样品， 容易感染 NoVs[ 。人类 HBGAs遗传多样性是 结果 53份检测出NoVs，检出率为 10．5％，牡蛎等 导致对NoVs敏感性存在差异的重要原因之一 J。 贝类受到NoVs的污染成为一个全球性的问题。 HBGAs是一类与糖蛋白结合的碳水化合物， 作为NoVs传播重要载体的