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有关TSK的说明
TSK-GEL柱(亲合/凝胶过滤) TSK-GEL HPLC柱广泛用于生物高分子(特别是肽和蛋白质)的分析、提纯和离析。 亲合柱 高效、树脂基TSK-GEL亲合柱(10(m颗粒),用于分离或提纯多种酶和其它蛋白质。 表1叙述了所提供柱的特性。 TSK-GEL柱 固定化配体 吸附容量(每ml凝胶) 典型应用 ABA-5PW 对氨基苯甲脒 3-4mg胰蛋白酶 胰蛋白酶,牛凝血酶,尿激酶,肠激酶, 纤溶酶原,纤溶酶原激活物 Boronate-5PW 间-氨基苯硼酸 40(mol山梨醇 糖蛋白,核酸酶,核苷酶,儿茶酚胺, 糖酶,转移核糖核酸 Chelate-5PW 亚氨基二乙酸 ~20(mol Ca2+或Zn2+ 血清蛋白,干扰素,胶原酶,颗粒蛋白, 溶酶原激活物,乳酸铁 Heparin-5PW 肝素 2-3mg抗凝血酶111 聚沉因子,DNA和RNA聚合酶, 脂蛋白和脂蛋白脂肪酶,其它酶 Tresyl-5PW -CH2OSO2CH2CF3 活化载体,通过与氨基或硫醇基反应的 固定化配体 表1:TSK-GEL亲合柱特性 凝胶过滤 TSK-GEL SW和SWXL柱含硅胶基亲水键合相填料与蛋白质相互作用最小。普及型TSK-GEL SW和SWXL柱 的性质列于表2。 TSK-GEL柱 颗粒尺寸((m) 孔尺寸(A°) 样品分子量(球状蛋白质) G2000 SWXL 5 125 5-150 X 103 G2000 SW 10 125 5-100 X 103 G3000 SWXL 5 250 10-500 X 103 G3000 SW 10 250 10-500 X 103 G4000 SWXL 8 450 20-10,000 X 103 G4000 SW 13 450 20-10,000 X 103 表2:TSK-GEL SW和SWXL柱的特性 (流动相:在0.1M磷酸盐缓冲剂(PH0.7)中0.03M Nacl水溶液。) 一根30 cm TSK-GEL SWXL柱和一根60cm TSK-GEL SW柱提供类似的分辨,但是SWXL柱只需一半时间。样的容量随柱长按比例增加。 图A,在TSK-GEL和TSK-GEL SWXL柱 上具有相当的分辨。因为TSK-GEL SWXL柱 和TSK-GEL SW柱是硅胶基质,绝不能超 出推荐的PH:2.5-7.5范围之外的操作。详细 操作条件随柱资料中说明。我们建议用适当的 SWXL柱和SW保护柱保护这些柱子。 TSK-GEL QC-PAK柱尤其在质量控制应用中提供快速、高分辨分析。15cm玻璃或不锈钢柱用5(m SWXL载体填充。 TSK-GEL PW和TSK-GEL PWXL柱 用于工业水溶性聚合物和低聚糖的高性能凝胶过滤分离。这些柱的特性列于表3(略)。 亲水聚合物基质具有极好的化学和机械稳定性。虽然,通常使用含水溶剂,但该聚合物可与多达50%有机溶剂相溶。亲水PW型树脂的亲水性不如多糖凝胶,因此,加入有机改性剂或有时需要减少盐浓度以降低疏水相互作用。除G-Oligo-PW和G2000PW之外,TSK型树脂具有少量剩余负电荷。 TSKgel GMPW和TSKgel GMPWXL柱是在宽分子量范围内呈线性校正曲线的混合床柱。因为混合床柱的孔尺寸与窄孔尺寸柱相同,校正曲线的斜率要陡的多,这样就限制了分辨。当样品的分子量组成未知时,混合床柱对于其初步研究是理想的。当样品的分子量分布非常宽时,将选择具有某一孔尺寸(或孔尺寸范围)的第二根柱(或一系列柱)串接,以提供最佳分辨。TSKgel G-Oligo-PW柱专门用于分离不带电的或阳离子低聚物。少量残存正电荷使得G-Oligo-PW和G2000PW柱不适于分析阴离子低聚物。 另一种专用柱TSKgel G-DNA-PW柱与G6000PW柱的区别在于其颗粒尺寸更小,具有更高柱效,适于核酸分离。对于G2500PW到G6000PW和GMPW柱建议使用一根TSKgel PWH保护柱。对于所有PWXL柱和G-NDA-PW柱应使用TSK gel PWXL保护柱,使用Oligo保护柱保护G-Oligo-PW和G2000PW柱。可定购散装填料重新填充PW-型柱和保护柱。 疏水作用 疏水作用色谱法(HIC)和反相液相色谱法(RPLC)都是基于蛋白质的疏水性进行分离,并允许蛋白质选择性结合和吸附。但是HIC在相当低的结合能下分离并使用含水流动相。这些特性提供了不大可能干扰蛋白质构象的柔和分离方法。因此,HIC通常更好的保持物质活性。TSK -GEL Ether(醚)-5PW,phenyl(苯基)-5PW和Butyl(丁基)-NPR树脂基柱为色谱条件优化提供了一个疏水性范围。通过使用完全疏水的填料(如丁基)可使硫酸铵浓度降至最低。
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