苦瓜素治疗柯萨奇B3病毒性心肌炎疗效及机制的研讨.pdfVIP

儿治疗前后的骨龄变化，是目前国际公认预测成年预期身高ila准确的方法。短期结果 虽尚不能说明中药能改善成年预期身高的效果，但治疗后△BA/LCA接近至少说明 骨龄提前的趋势得到了初步遏制，有待更长时间的随访观察。 雌激素是在青春期促进女童骨骼生长、身高加速的主要激素之一，生长激素不是 直接作用于骨骼促进生长发育的，而是通过另一种主要由肝脏分泌的生长介素一胰岛 素样生长因子(IGF)来完成的。而且，由于生长激素呈脉冲样分泌，较难测定准确，而 胰岛素样生长因子极其结合蛋白IGFBP却相对恒定，我们试图研究患儿早发育与生 长介素的关系，结果发现 IGF-1及IGFBP-3与患儿Tanner分期、身高增长速度有一 定关系(另文发表)，有待进一步研究。 苦瓜素治疗柯萨奇B3病毒性心肌炎疗效及机制的研究 李双杰 邓日军 吕建华 ▲张宝林 二万腊香 王 佐 吴孟津 (衡阳医学院附属第一医院 421001) ▲ (湖南医科大学附属湘雅医院) 衡〔阳医学院分子生物研究中心) 病毒性心肌炎是一种常见的获得性心肌疾病之一，近年来发病率呈逐年上升趋 势，成为青少年碎死的重要原因，严重危害人类健康，但目前尚无有效的抗病毒药物治 疗。开发抗病毒药物是目前的研究热点，尤其是从天然植物中发掘抗病毒有效成分，更 是一条重要途径。苦瓜(MomordicacharantiaL)为葫芦科属植物苦瓜的果实，已有数 百年的食药两用史。近年来国内外学者从苦瓜果肉、种仁中分离纯化多种有效成分，发 现有明显的抗病毒、抗肿瘤、调节免疫等多种生物学活性，具有很高的药用价值Ctl，我 们从苦瓜果肉中分离纯化一种分子量为28Kda的水溶性蛋白质有效成分，称之为苦 瓜素(Momordicin)，在体外发现有明显的抗亲心性柯萨奇B:病毒(CoxsickievirusB CVB3)感染的作用121。本研究进一步观察苦瓜素治疗实验性小鼠CVB，心肌炎的疗效， 并对其作用机制进行初步的研究，为将来该药的开发与应用提供实验依据。 材料与方法 一、材料 1、实验动物 4周龄、雄性、纯种、清洁级BALB/C小鼠，购于上海西普尔必凯实 验动物公司。 2、苦瓜素 选择衡阳市郊区廖家湾村种植的新鲜成熟苦瓜，参照Barbieri等[3)方 法加以改进，去籽压汁，乙醇分级沉淀、凝胶过馆层析、离子交换层析及低温真空干燥 而成C[2l。采用高效液相色谱法进行质量控制。用生理盐水配成3%溶液，0.22fem过滤 器过滤除菌,4C保存备用。 3、病毒 CVB,(Nancy株)由湖南医科大学公共卫生学院唐红专教授惠赠。在 HeLa细胞中传代，冻融离心三次，上清液分装，在HeLa细胞测 50%组织感染率 .49. 一 ~ ，， (TCID)为 10，，一7OC保存备111。实验用病毒址为2XlOTCID,o0 4、主要试剂 总RNA提取试剂为QIAGEN产品、RT-PCR试剂为Promege产 品。CVB引物参照文献[]‘由GIBCO/BRL合成，上游引物Cl5-CCCCGGACT GAGTATCAATA一3(180-199),C25一‘GCAGTTAGGATTAGCCGCAT -3(479-460)，扩增产物长度为300bp，内参照引物murineMmyogene(M1,M2)由 衡阳医学院分子生物中心万腊香博士提供。产物长度为220bp,ELISA法干扰素检测 试剂为Endogen产品。 二、方法 1、动物模型及治疗方法 70只小鼠分别腹腔注射。.lml内含CVB:病毒2X 103TCID5。的PRIM-1640建立病毒性心肌炎模型，随机分为两组:A组为苦瓜素处理 组，在接种病毒30min后腹腔注射。.lml苦瓜素液(剂量为5mg.kg-.d-)，每日一 次，共七天，B组为生理盐水对照组，在接种病毒30min后腹腔注射生理盐水0.lml, 每 日一次，共七天。另设8只正常小鼠为正常对照组(C组)，腹腔注射O.lml不含病毒 的PRIM一1640液30min后腹腔注射生理盐水0.lml，每天一次，共七天. 2、观察指