鼠类抗药性的监测方法与治理技术081106.pptVIP

广 东 省 农 田 鼠 类 抗 药 性 监 测 地 点 农田害鼠对第一代抗凝血剂的抗药性监测结果 地点 鼠种 致死剂量 (mg/kg) 存活剂量 (mg/kg) 死亡天数 （d） 抗性率 （％） 广州番禺区 黄毛鼠 12.47 17.12 11.5 33.33 江门新会区 黄毛鼠 12.83 16.41 12.0 36.67 佛山高明区 黄毛鼠 9.07 13.49 8.3 16.67 湛江遂溪县 黄毛鼠 7.60 14.15 7.9 3.33 汕头澄海区 黄毛鼠 10.96 － 7.6 0.0 清远清新县 黄毛鼠 11.45 － 7.9 0.0 韶关翁源县 黄毛鼠 10.57 － 7.3 0.0 梅州兴宁市 黄毛鼠 9.86 － 7.3 0.0 湛江雷州市 板齿鼠 0.11－5.7 － 8.3 0.0 湛江廉江县 黄胸鼠 98.45 154.3 7.7 10.4 致死期食毒法(LFP)法 血凝反应法(BCR法) 基因检测法 四、鼠类抗药性检测方法 致死期食毒法(LFP法) 抗药性测定的标准药物：杀鼠灵毒饵. 杀鼠灵标准品：纯度99％，熔点159－162℃. 食毒期：WHO推荐的98%或99%敏感靶标鼠种的食毒期(LPF98/LPF99)的95%置信上限取整数天。 研究不同鼠种对抗凝血灭鼠剂的敏感基线并确定LPF99，是采用LFP法检测抗性的重要基础 褐家鼠0.005％ 黄胸鼠0.05％ 小家鼠0.05% 黄毛鼠0.002％； 板齿鼠0.002％； 黑线姬鼠0.005％； 长爪沙鼠0.005％； 大足鼠0.025%； 达乌尔黄鼠0.05％。 毒饵浓度： 靶鼠室内单笼饲养适应1周，选择成年、健康、非孕个体进行试验。 用食盒供给无毒诱饵2d，第2d吃饵不及全部试鼠平均摄食量20％的个体淘汰。 褐家鼠饲喂6d标准毒饵、黄胸鼠9d、小家鼠11d、黄毛鼠9d，每天称毒饵消耗量，第1天吃毒饵不及前一天无毒饵的10％的个体淘汰。 攻毒期结束后，试鼠正常饲养观察：褐家鼠20d、黄胸鼠25d、黄毛鼠20d、小家鼠30d。试验期间产仔或无出血体征的死鼠淘汰。 检测步骤 抗药性个体: (1) 试验期结束仍存活； (2) 存活者摄药剂量(mg/kg) 达到：褐家鼠12、 黄胸鼠143、小家鼠338、黄毛鼠10. 抗药性种群: (1) 试验样本至少20只，抗性发生率达15％； (2) 样本的总平均摄药剂量(mg/kg)达到：褐家 鼠12、黄胸鼠143、小家鼠338、黄毛鼠10. 抗药性判别标准 技术简单(笼养，毒饵给药)； 耗时耗力，工作量大； 有一定误差. 野外条件下有的害鼠有一定的耐受性或对毒饵的选择作用而存活下来，但是当处于实验检测时却有可能死掉而被归于敏感鼠； 缺乏人道. 致死期食毒法的特点 抗凝血剂的作用靶标是维生素k环氧化还原酶（VKOR），通过阻断VK的循环利用，使凝血因子合成受阻，无法完成正常的凝血过程而发生致命的大出血。VKOR活动度是检测鼠类抗药性的主要指标。 血凝反应法(BCR法) BCR法的技术原理 抗凝血剂对VKOR活动度的影响采用血凝时间长短来衡量,转换成凝血活度(PCA)或INR值。 鼠类摄入抗凝血剂后，通过抽取血样检测凝血活度(PCA)或INR值，计算抗凝血剂对VKOR活动度的抑制率，即可区分该鼠的抗药性情况。 C.Bailey等发展了一种微量血样本BCR法，通过从尾部取血大大减小了对鼠的伤害及测试成本. 杀鼠灵抗性鼠标准: VKOR抑制率低于82.5% (Martin等,1979)； 溴敌隆和鼠得克抗性鼠个体标准：VKOR抑制率低于87.5% (Pelz等,1993)； 抗性种群的标准：VKOR活动度大于敏感种群的活动度17.5%. 抗性鼠、抗性种群的划分标准 测试抗凝血药物对靶标鼠种的BCR基线. BCR法的检测路线 靶标鼠摄入抗凝血剂前后抽取血样. 检测抗凝血剂对靶标鼠的凝血指标. 计算抗凝血剂对靶标鼠VKOR活动度的抑制率， 评价其抗性状况. 增加了检测的可重复性和准确性。 BCR法不受动物取食行为影响，试鼠也可以饲养后再进行确认检测. 快速而且合乎人道。 便于进行地域间、药物间和种间的不同抗性水平的比较. 是一种相对成熟的抗性检测方法。BCR法对杀鼠灵、鼠得克、溴敌隆等都被证明是可行的. 花费大。BCR法需要抗凝血剂处理及取血样进行检测. BCR法的特点 基因检测法 基因检测法通过检测抗凝血剂抗性控制基因的突变情况来判