展示在巴斯德毕赤酵母细胞表面的内切-1,4-β-葡聚糖酶的酶学性质.pdfVIP

第 38卷第 1期 河 北 农 业 大 学 学 报 Vo1．38NO．1 2015年 1月 JOURNAIOFAGRICUITURAIUNIVERSITY 0FHEBEI Jan．2015 文章编号：1000—1573(2015)01—0078—05 DOl：10．13320／i．cnki．jauh．2015 ． 0014 展示在 巴斯德毕赤酵母细胞表面的内切一1，4一』3一 葡聚糖酶的酶学性质 李靖一 ， 赵 男。， 谢 晶 ， 于宏伟 ， 马 雯 ， 郭润芳 (1．河北农业大学 食 品科技学 院，河北 保定 071000；2 河北省科学技术情报研究院，河北 石家庄 05i000) 摘要 ：本研究 目的是利用毕赤酵母细胞表面展示技术来改善 内切一i，4一B一葡聚糖酶的酶学性质 。结果显示 ， SDS—PAGE显示展示酶 (DEG)的分子量为 34．1kDa，对 CMC—Na有底物专一性 。与游离酶 (FEG)相 比，DEG 的最适作用温度和最适作用 pH值未发生变化，分别为 7O℃和 4．0；对底物的亲和力降低 ；pH 2．5～8．5时酶 活残留率为6o ，比游离酶高0．5倍 ；温度 7o℃时酶活无损失，残留率为 102 ，同等条件下比游离酶高 1．5 倍 ；DEG重复使用 1O次以后保留活性仍为 65 ；而且展示酶对 Co 、Mn 、Hg。等重金属离子 的耐受力也大 大增强。本研究结果表明，展示 内切一1，4一B一葡聚糖酶的酶学性质得到大幅度改善 ，其酸热稳定性、重金属离 子耐受性和操作稳定性均有所提高，DEG作为一种酵母全细胞生物催化剂在各种纤维素降解领域具有很广阔 的应用前景 。 关 键 词 ：内切一l，4一S一葡聚糖酶 ；毕赤酵母 ；细胞表面展示 ；酶学性质 中图分类号：Q814 文献标志码 ：A Enzymaticpropertiesofendo一1，4一p—glucanasedisplayedon Pichiapastoriscell-surface LIJing—yi，ZHAONan。，X!EJing ，YUHong—wei，MA Wen，GUO Run-fang (1．CollegeofFoodScienceandTechnology，AgriculturalUniversityofHebei，Baoding071000，Chinal 2．HebeiScienceandTechnologyInformationResearchInstitute，Shijiazhuang051000，China) Abstract：Thepurposeofthisstudyistoimprovetheenzymaticpropertiesoftheendo一1。4— 8一glucanaseusingPichiayeastcell—surface—displaytechnique．Theresultswereasfollows： SDS—PAGEresultshowedthatthemolecularweightofthedisplayedendo一1，4一p—glu— canase(Displayedendo一1．4—8一glucanase，DEG)was34。1kDa，Comparedwith thefree endo一1，4一p—glucanase(Freeendoglucanas，FEG)，DEGhadthesamesubstratespecificity forCMC—Na．Theoptimum temperatureandpH valueofDEG werestill70 ℃ and4．0，re— spectively，buttheaffinityofDEG forsubs