特异性甲基化you导剂Surkex 抑制Survivin 表达.pdfVIP

上海交通大学硕士学位论文 1前言 1.1DNA 甲基化与基因沉默 真核基因的表达受细胞核内 外多层层次的调节 呈现多级调控 包括遗传调 控(genetic regulation)和表观遗传调控(epigenetic regulation) 遗传调控包括基因转录 转录后加工 翻译以及翻译后修饰等环节 其中转录水平的调控是真核生物遗传咨 询传递过程中第一个具有高度选择性的环节 在遗传调控 过程中 反式作用因子 与顺式作用组件间的相互作用是构成基因表达调控网络的基础 表观遗传调控是指 转录前基因在染色质水准上的结构调整 它是真核基因组一种独特的调控机制 继 人类基因组序列测定工作完成后 以不改变基因组的碱基序列只改变基因组的修饰 为研究内容的表观遗传学已成为生命学科的研究前沿 其研究内容主要包括 DNA 甲基化(DNA methylation) 组蛋白修饰(histone modification) 染色质重塑(chromatin remodeling) RNA 干扰及反义(antisense)RNA 等 1.1.1DNA甲基化及其建立 [1] 在哺乳动物中,DNA 甲基化主要发生在二核苷酸胞嘧啶(CpG) 第5位碳原子上 , 在 DNA 甲基转移酶(DNA methyltransferase , DNMT) 的作用下, CpG 二联体中的胞 嘧啶环5’位的氢被 S-腺苷甲硫氨酸 S -adenosine methionine, SAM 的活性甲基所 取代 从而变成 5’- 甲基胞嘧啶 (5- mC) 人类基因组中的 CpG 以两种形式存在,一 种是分散于 DNA 中,另一种是 CpG 结构高度聚集的 CpG 岛 研究表明 在哺乳动 物进化过程中大部分CpG 位点被丢失 仅存留 1%人类 DNA 中的CpG 未丢失[2 3] 大部分存留的CpG 在成人组织细胞中是被甲基化的 哺乳动物细胞基因组中大约3%-5%的胞嘧啶是以5- 甲基胞嘧啶的形式存在的 大约70%-80% 的5- 甲基胞嘧啶位于CpG 中 真核生物基因组的 CpG 序列发生甲基 1 特异性甲基化诱导剂Surkex 抑制Survivin 表达 化的频率非常高 大约 70% 但是 40%-50% 的基因在 5 端启动子附近有一段大 [4] 约1kb 长的区域 富含没有甲基化的GpC 和CpG 被称为CpG 岛 甲基化的CpG 岛通常存在于失表达的组织特异性基因的启动子 印迹失活的常 [5] 染色体等位基因的启动子和女性失活的 X 染色体上各基因的启动子 且甲基化是 维持该区域转录失活状态的必要因素 在不同组织或同一类型细胞的不同发育阶 段 基因组 DNA 上各 CpG 位点甲基化状态的差异构成基因组 DNA 甲基化谱 基 因DNA 异常甲基化会导致人类多种疾病的发生和发展[6] 目前已知有两类DNA 甲基转移酶(DNA methyl-transferase DNMT)参与 DNA [7] 甲基化的建立和调节 一类是重新甲基化的 DNA 甲基转移酶 DNMT3a 和 DNMT3b 另一类是维持甲基化的DNA 甲基转移酶DNMT1 哺乳动物生殖细胞的 基因组在前囊胚期早期经历了去甲基化 而在胚胎植入期经历一个重新甲基化的过 程 此时大部分CpG 岛在DNMT3a 和 DNMT3b 的作