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酶工程宝典 本文由huojia2006贡献 doc文档可能在WAP端浏览体验不佳。建议您优先选择TXT，或下载源文件到本机查看。 酶工程宝典 生物工程专业专用 1.酶：具有生物催化功能的大分子物质，包括蛋白类和核酸类。 2.酶工程：利用酶学、微生物学的基本原理与化学工程有机结合二进行酶的生物合成、分离纯化、分子 修饰的一项生物工程技术。 3.酶的发展史：（1）原始期：4000 多年前，夏禹，酿酒；（1）近代酶制剂，真正开始于 19 世纪，应 用先例：淀粉酶；（3）现代酶制剂工业：1949，日本，深层发酵细菌α－淀粉酶发酵生产，揭开 序幕；1982，切克发现核酸类酶。 4.酶工程发展史：（1）酶的发展史；（2）现阶段又增添了多项技术：a,固定化酶：酶与载体结合，呈 水不溶性状态，而仍具有催化活性的现象；b，固定化菌体：为了省去酶分离纯化的过程，在固定 化酶的基础上出现的技术；c，固定化细胞和原生质体：包括固定化细胞和增值细胞。 5.酶的生产方法：（1）提取分离法：采用各种提取分离、纯化技术从动植物组织、器官、细胞或微生 物细胞中将酶提取出来，再进行分离纯化的过程；（2）生物合成法：利用微生物细胞、动植物细 胞的生命活动而获得人们所需要的酶的技术过程。（3）化学合成法：1965，结晶牛胰岛素等。 6.酶工程应用情况：（1）在医药方面的应用：酶诊断，药物制造，治疗疾病，分析检测等；（2）在食 品方面的应用：制糖工业，啤酒发酵，食品保鲜，乳品工业，食品制造，果蔬加工等；（3）在轻 工业方面的应用：原料处理，轻工业 产品方面的应用，加酶增加产品的效果；（4）在畜牧业生产 中的应用：加酶饲料，饲料青贮等；（5）在能源开发方面的应用：乙醇生产，氢气制造，生物电 池；（6）在环保方面的应用：水净化，处理白色污染，废气，废油，环境监测；（7）在生物技术 领域的应用：除去细胞壁，分子切割，拼结。 7.酶催化作用特点：（1）专一性：绝对专一、相对专一。锁钥学说：酶与底物镶嵌结合；诱导契合学 说：酶受底物诱导发生构象变化而结合；（2）高效性：10 ～10 倍；（3）条件温和。 8.酶的命名与分类：命名： （1）推荐命名：底物名称＋催化反应类型；（2）系统命名：包括作用底物、 作用基因、反应类型。分类：（1）蛋白类酶：氧化还原、水解、聚合、异构、转移、连接或合成 酶；（2）核酸类酶：a，分子内催化的核酸类酶：自我剪切酶、自我剪接酶；b，分子间催化的核 酸类酶：作用于 DNA 的核酸类酶，作用于 RNA 的核酸类酶，作用于多糖的核酸类酶，作用于氨基酸 的核酸类酶。 9.影响酶催化作用的因素：（1）底物浓度；（2）酶浓度；（3）温度；（4）pH 值（5）抑制剂；（6） 激活剂。 10.酶活力测定：（1）方法：化学、光学、气体法；（2）步骤：a，选择适宜底物及一定浓度；b，确 定反应条件；c，确定酶催化反应的时间；d，终止反应。（3）固定化酶的活力测定：与水不溶性 载体结合在一定空间范围内起催化作用的酶。方法：a，振荡测定法；b，酶柱测定法；c，连续测 定法。 11.动植物细胞的培养条件及控制：（1）植物：a，工艺流程：植物体的选择与处理→植物细胞的获取 →细胞悬浮培养分离纯化；b，条件控制：培养基、温度、pH、溶解氧、光照等控制；前体的添加。 （2）动物：a,培养基：11 种氨基酸、V 、无机盐、葡萄糖、激素、生长因子的添加；b，培养条件： 36.5℃、pH 7-7.6、渗透压：700-750KPa、溶解氧。 12.酶生物合成的原理：以中心法则为理论基础，经过预先设计，通过人工操作利用微生物的生命活动 而获得所需酶。 13.常用产酶微生物：（1）细菌：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌；（2）放线菌：链霉菌；（3）真菌：米曲 霉、红曲霉、黑曲霉、青霉等；（4）酵母菌：啤酒酵母、假丝酵母 14.高产菌株的选育原则：（1）自然选择法；（2）物理化学诱变法：选用多种诱变方法处理，在较高 死亡率情况下，诱变效果才会好；（3）根据代谢的调节机理，选择酶的高产突变株：a，添加诱导 康 婷 （ 中 国 ） 集 团 康 婷 生 物 科 技 有 限 公 司 ★ 考 试 中 心 ★ 荣 誉 出 品 2005-05-17 酶工程宝典 生物工程专业专用 剂；b，降低阻遏物的浓度；c，利用营养缺陷型菌株的特征；d，抗终产物阻遏；e，抗分解代谢物 阻遏。 15.发酵条件及对产酶的影响：（1）温度：细菌 37℃，真菌 28-32℃；（2）pH：细菌放线菌 6.5-8.0， 霉菌、酵母菌：4-6；（3）溶解氧：氧的传递：（空气→溶解氧→透过细胞膜进入原生质→参与细 胞生化反应；（4）搅拌：与溶解氧气浓度与控制温度有关；（5）泡沫