一株海绵放线菌的分离培养发酵条件优化及其抑制弧-大连海洋大学.PDFVIP

第32卷第4期 大 连 海 洋 大 学 学 报 Vol.32 No.4 20 17 年 8 月 JOURNAL OF DALIAN OCEAN UNIVERSITY Aug. 2017 DOI:10.16535/ j.cnki.dlhyxb.2017.04.014 文章编号:2095-1388(2017)04-0457-08 一株海绵放线菌的分离培养、 发酵条件优化 及其抑制弧菌效果 1 2 2 2 2 2 杜英侠 , 李晶莹 , 傅敏 , 张鑫 , 曲春强 , 李小艺 , 2 3 4 2、5 张菊林 , 顾颖 , 王选骏 , 付晚涛 (1郾 大连海洋大学 水产与生命学院, 辽宁 大连 116023;2郾 大连海洋大学 海洋科技与环境学院, 辽宁 大连 116023;3郾 大连市长 海县渔政管理所,辽宁 大连 116500;4郾 大连市海监渔政局, 辽宁 大连 116001;5郾 辽宁省高校近岸海洋环境科学与技术重点实 验室, 辽宁 大连 116023) 摘要:为研究放线菌对海水养殖病原弧菌 (哈维弧菌Vibrio harveyi和灿烂弧菌Vibrio splendidus) 的抑制效 果, 从繁茂膜海绵Hymeniacidonperlevis 中分离筛选出了一株具有抑菌活性的放线菌 (FH), 并采用16S rD鄄 NA 基因序列进行分析, 初步鉴定为球孢链霉菌Streptomyces globisporus; 以抑菌活性为导向对放线菌FH菌 株的发酵条件进行优化, 并通过测量发酵沉淀菌丝体干质量, 获得了FH菌株生长曲线, 同时研究了发酵 产物保存温度及时间对抑菌效果的影响, 以及 FH发酵产物在灭菌海水中对弧菌的抑制作用。 结果表明: 对FH菌株生长曲线测定结果显示,0~15 h为适应期, 15~72 h为指数生长期,72~120 h为稳定期, 120 h后为衰亡期; 抑制弧菌效果试验显示, FH菌株发酵正交试验的最优条件为温度25 益、 pH7郾5、 装液量 30 mL (250 mL三角瓶); 在正交试验最优条件下, FH菌株发酵培养72 h获得的粗提物抑制哈维弧菌和灿 烂弧菌的效果最好; FH菌株发酵粗提物在4 益和-20 益下保存60 d和在室温保存7 d, 其抑菌效果无显著 性差异 (P0郾05); 在100 mL灭菌海水中, FH菌株发酵产物2 mL可有效抑制哈维弧菌和灿烂弧菌的繁 殖。 研究表明, 海绵放线菌及其发酵产物在海水养殖领域具有潜在应用价值。 关键词:海绵放线菌; 弧菌; 发酵条件优化 中图分类号: Q93摇 摇 摇 摇 文献标志码: A 摇 摇 弧菌是海水养殖中最常见的一类条件致病菌, 受到人们的广泛关注。 海绵是一种简单古老的多细 [1] 已成为海水养殖动物的主要病原菌之一 。 哈维 胞动物, 能产生比其他海洋生物更加丰富的生物活 弧菌 Vibrio harveyi 能感染多数海水鱼类和对 性产物, 从海洋中分离出的活性化合物约40%来 [2-3] [12] 虾 , 如鲈的出血病, 引发死亡率高达 50% 以 自海绵 。 同时, 海绵也是海洋放线菌最重要的 上, 严重时可达80% ~100%[4-6]。 灿烂弧菌 Vibrio 一种共附生动物, 其体内的微生物可占海绵总生物 splendidus是引起刺参腐皮综合征