人乳头状瘤病毒16、45和58型假病毒小鼠感染模型的建立.pdfVIP

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JMicrobiol ·791· 主堡筮生塑堂独盘瘴堂盘查!塑生2旦筮垫鲞筮!扭Chin lmmunol,September2008,V01.28,No.9 .病毒学. 人乳头状瘤病毒16、45和58型假病毒 小鼠感染模型的建立 吴雪伶何红伟 张春涛 聂建辉樊金萍 邵荣光 王佑春 【摘要】 目的建立人乳头状瘤病毒(HPV)假病毒小鼠感染模型。方法将密码子优化的 HPV衣壳蛋白基因表达质粒和荧光素酶报告基因表达质粒共转染293FF细胞,48h后收集裂解细 胞,收获假病毒,并对假病毒滴度进行测定。试验小鼠皮下注射甲羟孕酮醋酸酯,4d后阴道灌注壬 苯醇醚-9,并在6h后阴道灌注假病毒,7d后阴道灌注荧光素酶底物,并检测荧光素酶报告基因的表 达情况。结果成功制备了3种型别(HPVl6、HPV45和HPV58)的假病毒,其滴度分别为3.7×108 TU/ml、1.5×10。TU/ml和1.2×108 TU/ml。在3种假病毒感染的小鼠体内可见发光区域,其荧光信 号强度分别为1.779×106p/s、5.738×10’p/s和1.829×106p/s。结论成功建立了HPVl6、45和 58型的小鼠感染模型,为HPV感染干预研究、疫苗评价及预防药物的筛选奠定基础。 【关键词】人乳头状瘤病毒;假病毒;感染模型;壬苯醇醚-9 TheestablishmentofthemOllSemodelbasedOilthe ofhuman pseudovirions types16. papmomavirus 45and鼹WU Xae—lin91,HEHong-wei.zHANGChun-tao,NlEJ讧阶hui.F必Jin-ping.s}lAoRorLg- theControl guang,吼鹏You—chun.‘Nationallrtstituttfor ofPharmaceuticaland肋嘶以Products,Bei- 100050.China iing author:WANG Corresponding You-chun.Email:wychun3@yahoo.tom Toestablishthemousemodelforhuman and 【Abstract】Objective papillomavlmstypes16,45 58 the D∞udo订rio珊.MethodsThe293FTcellswereco.transfectedwithcodon.modi6ed by corresponding HPV witha theluciferage ceilswerecollected reporter capsidsgenestogether plasmidcontaining gene.7llle and the W88collectedandthetitration mollgewassubcutaneous- lysed.thenpseudovirus w船performed.The with 4dand with 6hlater lyinjectedDepo.Provera.Afterintravaginallyi.jectednonoxynol-9.andpseud. oviruseswereinoculatedin 7 mousew88instilledIuciferinsubstrate intravaginal.Afterd.the intravaginally. andthe leveloftheluciferageWag

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