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分子生物学部分课题

一、试述DNA损伤切除修复的概念、过程及特点。????答:概念:多步骤多酶参与的过程。???????? 过程:在DNA内切酶、外切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶等多种酶的共同作用下,先将DNA受损部位切除,然后以另一条链为模板,合成一段正确配对的碱基序列来修补缺口。???????? 特点:DNA损伤最普遍的修复形式,尤其是哺乳类动物;???二、试述DNA损伤重组修复的概念、过程及特点。???答:概念:当DNA损伤较大、较严重,无法及时修复或缺乏切除修复酶系统,可跳跃损伤部位复制,子链形成缺口,复制结束后,在重组基因rec编码的酶(Rec蛋白)、DNA聚合酶、DNA连接酶等的作用下,将无损母链的DNA片段移到子链缺口,进行重组修复。发生在复制后,故又称“复制后修复”?????? ?过程:(1)复制:损伤母链复制时,越过损伤部位,子链对应位点留下缺口;无损母链复制成完整双链。???????????? (2)重组:有缺子链与无损母链重组,缺口转移到无损母链,?使损伤母链的子链完整,损伤母链仍然保留。???????????? (3)再合成:转移后的母链缺口以新的互补链为模板聚合补齐?????特点:(1)模板上的伤疤始终留着。只能随着重组修复次数↑,??????伤疤占的比例↓。?????????? (2)修复发生在复制后。?????????? (3)修复的对象是子代DNA。?三、基因突变概念,形式,意义???答:DNA损伤又称基因突变(gene?mutation):由于DNA分子中发生碱基对的替换、插入和缺失等,从而引起基因结构上发生碱基对组成或排列顺序的改变。突变形式:替换、缺失、插入、重排。意义:是生物变异的根本来源,为生物进化提供原料。???1、DNA损伤:又称基因突变(gene?mutation):?由于DNA分子中发生碱基对的替换、插入和缺失等,从而引起基因结构上发生碱基对组成或排列顺序的改变。????2、基因突变:同DNA损伤????3、切除修复:多步骤多酶参与的过程,在DNA内切酶、外切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶等多种酶的共同作用下,先将DNA受损部位切除,然后以另一条链为模板,合成一段正确配对的碱基序列来修补缺口????4、重组修复:当DNA损伤较大、较严重,无法及时修复或缺乏切除修复酶系统,可跳跃损伤部位复制,子链形成缺口,复制结束后,在重组基因rec编码的酶(Rec蛋白)、DNA聚合酶、DNA连接酶等的作用下,将无损母链的DNA片段移到子链缺口,进行重组修复。发生在复制后,故又称“复制后修复”SOS修复:DNA严重损伤难以修复或DNA复制系统受抑制的紧急情况下,为了保证DNA的完整性,应急产生校对功能的修复酶,采用填补任意碱基的方式修复。???1?凋亡apoptosis:多细胞有机体为调控机体发育、维持内环境稳定,由基?因控制的细胞主动性死亡过程。又叫程序性细胞死亡,是一种自然的生理过程。????2凋亡小体apoptotic?body:胞膜皱缩内陷、反折,包围凝集断裂的染色质、胞质、细胞器等形成芽状突起并分离,形成一些有膜包被,内涵物不外溢的小块,称凋亡小体???3程序性细胞死亡(PCD),Caspase:多细胞有机体为调控机体发育、维持内环境稳定,由基因控制的细胞主动性死亡过程。多细胞生物体个体发育过程中,预定的并受到严格程序控制的细胞死亡。?二、试述凋亡的形态学和生化特征。????答:形态学特征:1.细胞皱缩;?2.染色质边集核膜下,呈块状、新月形,3.细胞质浓缩;???4.凋亡小体形成;??5.凋亡小体内有结构完整的细胞器。????????凋亡的生化特征:1、染色质DNA片段化????2、内源性核酸内切酶激活??3、半胱天冬酶激活--凋亡蛋白酶激活?????4、钙离子浓度↑??????5、线粒体改变?三、试述凋亡和坏死的区别。?三、凋亡?/坏死? 细胞形态?皱缩?肿胀细胞膜?始终完整破裂细胞器形态改变轻肿胀、破裂细胞核染色质凝集、断裂?固缩、核膜破裂凋亡小体有无DNA断裂有规律、梯形条带?随即降解?分子机制多基因参与、有序控制?无基因调控炎性反应?无有 四、试述凋亡的死亡受体通路???答:死亡配体(细胞外)-死亡受体(细胞膜)--相关蛋白(中介蛋白,细胞质内)--激活Caspase8—激活Caspase3---细胞凋亡?五、试述凋亡的线粒体通路????答:①凋亡诱导因子AIF?释放,激活DNase,??促进Cyt.c释放????????②凋亡复合体形成(Cyt.c?+?Apaf?-1?+dATP+?caspase?9),激活caspase?,凋亡蛋白酶活化因子?(apoptotic?protease-activating?factor,Apaf?-1)????????③

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