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微生物学---第三章 微生物细胞的结构与功能
一、细胞壁 G+和G-主要由于其细胞壁 化学成分的差异而引起物理特性(脱色能力)的不同,并决定了染色反应的不同 通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。 G+由于其细胞壁较厚,肽聚糖网层次多和交联致密,故遇乙醇或丙酮作脱色处理时,因失水而使网孔收缩,能把结晶紫与碘复合物牢牢地留在壁内。 G-细胞壁薄,外膜层的类脂含量高,肽聚糖层薄和交联度差,遇到脱色剂后,以类脂为主的外膜被溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此,被脱色成无色。 4、特殊的休眠构造——芽孢 某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体,称为芽孢(endospore或spore,偶译“内生孢子”)。 二、细胞壁以内的构造——原生质体 二、细胞壁以内的构造——原生质体 4、特殊的休眠构造——芽孢 细菌芽孢的特点 整个生物界中抗逆性最强的生命体,是否能消灭芽孢是衡量 各种消毒灭菌手段的最重要的指标。 常规加压蒸汽灭菌的条件:121℃,15 min以上 115℃,30 min以上 芽孢是细菌的休眠体,在适宜的条件下可以重新转变成为营 养态细胞;产芽孢细菌的保藏多用其芽孢。 产芽孢的细菌多为杆菌,也有一些球菌。芽孢的有无、形态、 大小和着生位置是细菌分类和鉴定中的重要指标。 芽孢与营养细胞相比化学组成存在较大差异,容易在光学显微 镜下观察。(相差显微镜直接观察;芽孢染色) (1)产芽孢细菌的种类 能产芽孢的细菌属不多,最主要的是属于革兰氏阳性杆菌的两个属——好氧性的芽孢杆菌属和厌氧性的梭菌属 。球菌中只有芽孢八叠球菌属产生芽孢。螺菌中的孢螺菌属也产芽孢。芽孢的有无、形态、大小和着生位置是细菌分类和鉴定中的重要指标。 (2)芽孢的构造 4、特殊的休眠构造——芽孢 (3)芽孢的形成 ①DNA浓缩,束状染色质形成; ②细胞膜内陷,细胞发生不对称分裂,小体积部分即为前芽孢(forespore); ③前芽孢的双层隔膜形成,芽孢的抗辐射性提高; ④两层隔膜间充填芽孢肽聚糖后,合成DPA,累积钙离子,开始形成皮层,再经脱水,使折光率增高; ⑤芽孢衣合成结束; ⑥皮层合成完成,芽孢成熟,抗热性出现; ⑦芽孢囊裂解,芽孢游离外出。 4、特殊的休眠构造——芽孢 (4)芽孢萌发 由休眠状态的芽孢变成营养状态细菌的过程,称为芽孢的萌发,包括活化(activation)、出芽(germination)和生长(outgrowth)三个具体阶段。 芽孢衣中富含半胱氨酸的蛋白质的三维空间结构发生可逆性变化,从而使芽孢的透性增加,随之促进与发芽有关的蛋白酶活动。接着,芽孢衣上的蛋白质逐步降解,外界阳离子不断进入皮层,于是皮层发生膨胀、溶解和消失。接着外界的水分不断进入芽孢的核心部位,使核心膨胀、各种酶类活化,并开始合成细胞壁。 4、特殊的休眠构造——芽孢 (5)芽孢的耐热机制 芽孢与母细胞相比不论化学组成、细微结构、生理功能等方面都完全不同 渗透调节皮层膨胀学说 芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差 皮层的离子强度很高,产生极高的渗透压夺取芽孢核心的水分,结果造成皮层的充分膨胀。 核心部分的细胞质却变得高度失水, 因此,具极强的耐热性。 (6)研究芽孢的意义 ①芽孢是少数几属细菌所特有的形态结构。芽孢的存在和特点是细菌分类鉴定中的重要形态指标。 ②芽孢具有高度耐热性。用高温处理含菌试样,可以提高芽孢产生菌的筛选效率。 ③芽孢的代谢活动基本停止,休眠期特别长。为产芽孢菌的长期保藏带来了方便。 ④芽孢具有高度耐热性和抗逆性。能否消灭芽孢成了衡量灭菌手段的重要指标。 4、特殊的休眠构造——芽孢 (7)伴孢晶体(parasporal crystal) 少数芽孢杆菌,例如苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)在其形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体——δ内毒素,称为伴孢晶体。 伴孢晶体对200多种昆虫尤其是鳞翅目的幼虫有毒杀作用,因而可将这类产伴孢晶体的细菌制成有利于环境保护的生物农药——细菌杀虫剂。 特点:不溶于水,对蛋白酶类不敏感;容易溶于碱性溶剂。 4、特殊的休眠构造——芽孢 (7)伴孢晶体(parasporal crystal) 伴孢晶体 鳞翅目幼虫口服 伴孢晶体在肠道迅速溶解(中肠 pH 为9.0-10.5) 吸附于上皮细胞,引起渗透性丧失,肠道穿孔 肠道中的碱性溶液进入血液,后者 pH升高,昆虫全身麻痹而死亡 4、特殊的休眠构造——芽孢 (7)伴孢晶体(parasporal crystal) 三
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