2009～2015年湖北省和江西省病毒性腹泻病原学检测.docVIP

精品论文 参考文献 2009～2015年湖北省和江西省病毒性腹泻病原学检测 （1武汉大学生命科学学院 湖北 武汉 430072） 　　（2武汉市儿童医院检验科 湖北 武汉 430072） 　　【摘要】 目的：分析2009～2015年湖北省和江西省所有年龄段病毒性腹泻感染状况；腹泻病人的年龄分布、性别分布、月分布及对A组轮状病毒和诺如病毒进行分型。方法：收集2009年1月～2015年12月湖北省和江西省各哨点医院的腹泻病人的粪便样本，检测诺如病毒、轮状病毒（A组、B组、C组）、肠道腺病毒、札如病毒、星状病毒，并对A组轮状病毒和诺如病毒进行分型。结果：1.引起腹泻的病毒主要是A组轮状病毒，其在两省中的总阳性率为48.51%。抗原A组轮状病毒血清学G型和P型检测显示在两省中以G1型、G3型和P[8]型居多；B组轮状病毒和C组轮状病毒的检出率分别为0.7%和0.3%。诺如病毒和腺病毒的检出率分别为5.7%和5.23%,其中诺如病毒以GII型居多，高达97～98%。星状病毒的检出率为2.64%；札如病毒的检出率为0.32%。2.发生腹泻的主要是5岁以下儿童，特别是不满周岁和1岁的儿童。3.在性别上，男性患者要多于女性；在季节分布上在5～11月份腹泻概率较高。结论：在湖北省和江西省，引起腹泻的病毒主要是A组轮状病毒,特别是G1P[8]型和G3 P[8]型A组轮状病毒。发病高峰期在夏季-秋季，以5岁以下儿童为主。 　　【关键词】 病毒性腹泻各病毒检出率；A组轮状病毒血清学分型；诺如病毒分型；流行病学研究 　　【中图分类号】R18 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）30-0354-03 　　腹泻是人类一种常见的疾病，一直威胁着人类的健康，据调查显示在世界范围内婴幼儿死亡病例中大约1/9与腹泻相关[1]，并且仅腹泻本身就占全球疾病经济负担值的4.1%[2]。引起腹泻的因素有很多，包括病毒、致病细菌和寄生虫等[3]，其中引起腹泻的病毒有诺如病毒、札如病毒、轮状病毒、腺病毒、星状病毒等，这些病毒可通过污染的食物、水源、物品、空气等传播，经常在学校、社区、餐馆、医院等人群密集区域暴发，故极大影响了人类的健康和损害了经济的发展，所以，对其致病的因素进行长时间的监测就显得十分重要。本文主要对腹泻症候群中各种腹泻相关病毒进行监测，以达到对病毒性腹泻的预防和治疗目的[4]。 　　1.腹泻症候群流行病学检测流程 　　1.1 监测实验室 　　武汉大学病毒学实验室；湖北省的哨点医院有湖北省疾病预防控制中心、华中科技大学同济医院、武汉科技大学汉阳医院、武汉市儿童医院、武汉市第一医院等；江西省的哨点医院有江西省儿童医院、南昌市高新开发区医院。 　　1.2 检测内容和方法 　　监测病例为每日排便3次以上，且大便性状有改变（呈稀便、水样便、粘脓便或脓血便等）的门诊病例；监测对象为符合病例定义的各年龄组门诊病例；监测时间为2009年1月～2015年12月；监测病原体种类为诺如病毒、轮状病毒（A组、B组、C组）、肠道腺病毒、札如病毒、星状病毒。 　　1.3 标本的采集、运输和保存 　　本实验所采集的标本为粪便，由医院受过培训的人员来实行，采集的粪便用无菌容器盛装。标本采集后置于4℃，两天之内由专门配送人员将其置于冷藏包中送于监测实验室。 　　1.4 标本的处理 　　样本制成10%便悬液后，取上清，检测前先将一部分样本分装1～2ml至无菌冻存管中，-80℃冰箱永久保存，另一部分进行下面的检测实验。 　　1.5 样本的检测 　　A组轮状病毒主要采用ELISA的方法对其抗原进行检测，对于阳性的样本进行G、P分型，其他病毒如诺如病毒，札如病毒，B组和C组轮状病毒，腺病毒，星状病毒等用PCR/RT-PCR进行核酸检测。 　　（1）抗原的检测：根据ELISA说明书进行操作，在此不再累述。 　　（2）核酸的提取：核酸提取用QIGEN商品化的核酸提取试剂盒进行提取，提取步骤见说明书。并将提取后的核酸适当分装，至少保存一份至-80℃，以便后续研究和抽样检测。 　　（3）核酸的检测：首先进行模板的制备：对于RNA病毒应首先将提取的RNA逆转录为cDNA,以便于长时间稳定保存。对于DNA病毒可直接检测，除了腺病毒为DNA病毒以外，其他几种致腹泻病毒均为RNA病毒。 　　（4）质量控制：每一次实验中，抗原检测、核酸提取和检测过程中须设立阴性和阳性对照[5]。 　　1.6 结果处理 　　利用EXCEL表格中的数据透视图对结果进行处理。 　　2.实验结果 　　2.1 各类病毒在湖北省和江西省的检出率和分型结果 　　2.1.1核酸检测诺如病毒结果 　　表1 　　 　　表2显示A组轮状病毒