溶血性链球菌检验培训PPT讲义.ppt

溶血性链球菌检验  分布 溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源。引起化脓性感染、中毒性感染、超敏反应性疾病 生物学性状 1．形态结构 2．培养特性 3．分类 4．生化反应 5. 抵抗力 形态与染色 球形或卵圆形，直径0.5～ 1 μm，链状排列，链长短不一，短者4～8个细胞组成，长者20～30个 无芽胞，无鞭毛，培养早期（2~4h）形成透明质酸的荚膜 培养特性 需氧或兼性厌氧 营养要求较高，需补充血液、血清、葡萄糖等 在血清肉汤中易形成长链，管底呈絮状沉淀 在血琼脂平板上，不同菌株溶血不一 最适生长温度为37℃，最适pH为7.4-7.6 培养特性 ---血平板 血平板上菌落为灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有乳光，直径约0.5～0.75 mm，为圆形突起的细小菌落，乙型溶血链球菌周围有2～4 mm界限分明、无色透明的溶血圈 生化反应 分解葡萄糖，产酸不产气。对乳糖、甘露醇、水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的分解能力因不同菌株而异 一般不分解菊糖，不被胆汁溶解 触酶阴性(与葡萄球菌相区别) 毒素及侵袭性酶 链球菌溶血素 致热外毒素：曾称红疹毒素或猩红热毒素 透明质酸酶：又称扩散因子，溶解细胞间质 链激酶：又称链球菌纤维蛋白溶酶 ，能使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作用，该酶耐热，100℃50分钟仍可保持活性。 链道酶：又称链球菌DNA酶 杀白细胞素：能使白细胞失去动力 抵抗力 该菌抵抗力一般不强，60℃30min即被杀死 对常用消毒剂敏感 在干燥尘埃中生存数月 乙型链球菌很少有耐药性 微生物学检查 溶血性链球菌检测流程（GB/T4789.11） 25g(ml)样品+225ml无菌生理盐水 葡萄糖肉浸液肉汤 或匹克氏肉汤 血平板 血平板(分纯培养) 杆菌肽敏感试验 链激酶试验 观察溶血 革兰氏染色 报告 36+1℃ 24h 36+1 ℃ 24h 36+1 ℃ 24h 鉴定步骤 溶血及菌落形态的观察 革兰氏染色 链激酶试验 杆菌肽敏感试验 链激酶试验  ---原理 　致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶(即溶纤维蛋白酶)，此酶能激活正常人体血液中的血浆蛋白酶原，使成血浆蛋白酶，而后溶解纤维蛋白 链激酶试验 ---方法 吸取草酸钾血浆0.2mL，加0.8mL灭菌生理盐水，混匀，加入链球菌18-24h36℃肉浸液肉汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL ，混匀，置于36℃水浴10min,血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。 杆菌肽敏感试验 取乙型溶血性菌落的浓菌液涂布于血平板上，用灭菌镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌肽纸片置于上述平板上，36℃培养18-24h，如有抑菌圈出现即为阳性。用已知的阳性菌株做对照 结果报告 在 25g(ml）样品中检出或未检出溶血性链球菌 谢 谢 * *