液相色谱仪日常维护.pptVIP

1：液相系统维护流程图 日常维护 材料：不锈钢烧结，孔径10um 故障：堵塞 表现：管路中不断有气泡生成 措施：用5％～20％的稀硝酸，超声波清洗， 再用蒸馏水清洗 注意点：吸滤头拆下时不必将塑料管剪断 日常维护 单向阀 日常维护 日常维护 故障1：宝石球粘附于垫片 表现：泵无法吸液或排液，流路不通 措施：1）用针筒抽出口单向阀以产生负压， 使宝石球与垫片分开 2）拆下单向阀，放入异丙醇或水中， 用超声波清洗 日常维护 故障2：宝石球或塑料垫片受污导致密封不好 表现：系统压力波动大 措施：拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超 声波清洗 日常维护 故障：密封圈磨损而导致 密封不良 现象：系统压力波动大或 漏夜措施：更换密封圈 注意点： 更换密封圈 拆卸泵头前，柱塞杆 复位 （P－SET） 日常维护 故障：堵塞 现象：系统压力波动大或压 力偏高 措施：5％稀硝酸，超声波清 洗 判断依据：关闭排液阀，断开出口管路，设定流速1mL/min，如压力3kgf/cm2，则可能堵塞。 日常维护 日常维护 故障：样品池受污 表现：样品池和参比池能量相差较大 检查方法：设定250nm波长，通甲醇或水，查看SMPL EN和 REF EN，如两者相差较大，则样品池受污。 措施：用针筒注入异丙醇，清洗样品池；如污染严重， 拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中超声波清洗。 日常维护 2：手动进样器的样品注入 日常维护 操作注意点： 1）插针应插到底 2）进样应使用液相色谱专用平头进样针 3）清洗应使用专用针口清洗器 3：有机溶剂的优与劣 什么时候需要“HPLC”级有机溶剂 1. 等浓度洗脱法的微量分析 用光谱进行判断 2. 梯度洗脱法分析 3.1 等浓度洗脱法的微量分析 3.2 梯度洗脱法分析 梯度洗脱法的注意点 1.流动相使用HPLC级有机溶剂。 2.查看空白实验的数据。 3.遵守分析周期。 （最初的分析数据不采用） 4: 谈谈缓冲液 4: 谈谈缓冲液 选择缓冲液的步骤 1 .确定最佳分离状态时的流动相pH 2 .选择具有与流动相的pH相近的pKa 的缓冲液 （即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液） 3 .确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收 （在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和 柠檬酸的缓冲液） 代表性弱酸的pKa pK1 pK2 pK3 醋酸 4.87 柠檬酸 3.13 4.76 6.40 磷酸 2.16 7.2 1 12.32 5: 关于脱气 脱气的目的 1. 防止由气泡的产生引起的故障 2. 防止由溶解（在液体中的）气体量 的变动引起的检测不稳定程度 1）示差折射率检测器 *使折射率变化 2）UV检测器（200nm以下） *溶解氧气有吸收 3）荧光检测器 *溶解氧气有消光作用 脱气的方法 1. 吸气器法 *可以抑制制做流动相时产生的气泡 *只是暂时的脱气法 *不能解决因溶解气体造成的问题 2. He清除法 3. 使用氟树脂膜的减压脱气法 He清除法 使用氟树脂膜的减压脱气法 6: 予处理柱和防护柱 予处理柱和防护柱的位置 予处理柱的作用 用于免除流动相的影响 例如 1. 在离子色谱分析中，免除多价离子的不 良影响。 2. 在梯度洗脱分析中，使鬼峰后移，不影 响目的成分的分析。 3. 防止硅胶载体的溶解。 （使用碱性或含有胺的流动相时） 防护柱的作用 代替分析柱捕集样