HBV和HCV血清学、病毒载量和疗效的关系-陶传敏.pptVIP

HBV和HCV血清学、病毒载量在临床治疗效果评价中的应用 四川大学华西医院实验医学科 陶传敏 提纲 简介 乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒 简介（1） 肝炎病毒（hepatitis virus）：以侵害肝脏为主的一组病原体 病毒性肝炎感染率和发病率非常高 属于法定乙类传染病 五种：甲型、乙型、丙型、丁型和戊型肝炎病毒 简介（2） 甲型肝炎病毒 hepatitis A virus,HAV 乙型肝炎病毒 hepatitis B virus,HBV 丙型肝炎病毒 hepatitis C virus,HCV 丁型肝炎病毒 hepatitis D virus,HDV 戊型肝炎病毒 hepatitis E virus,HEV HBV分类 Hepadnaviridae(肝DNA病毒科) Hepadnavirus(正嗜肝病毒属) HBV临床意义（1） 血源性传播 输血、注射、外科和牙科手术、针刺等 母婴垂直传播 宫内传播 分娩时微小皮损处传播 产后母婴密切接触 性传播 HBV临床意义（2） 急性肝炎 起病急，突然畏寒、发热，全身乏力，食欲减退，伴有恶心、呕吐、厌油腻、肝区不适及尿黄等症状。B超提示肝脏肿大 慢性肝炎 起病缓，表现为反复乏力、食欲减退、腹胀、腹泻、肝区不适等症状。部分患者症状不明显 HBV生物学特性（1） 大球形颗粒，Dane颗粒 小球形颗粒 管形颗粒 HBV生物学特性（2） HBV virion HBV生物学特性（3） 不完全闭合环状双链DNA S、C、P和X 4个ORFs（开放阅读框架） S基因 C基因 P基因 X基因 HBV实验诊断（1） 血清学检测 HBVm: HBV血清学标志(两对半） 血清病毒学检测 HBV DNA定性和定量检测 HBV基因分型 HBV 耐药突变株检测 组织病毒学检测 HBsAg HBcAg HBV DNA HBV实验诊断（2）－血清学检测 HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及抗-HBc IgM 方法 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay，最常用，定性) 免疫层析法（胶体金或硒标法） 发光免疫分析(定量) 反相间接血凝试验(少用) HBV实验诊断（3）－ ELISA 利用抗原和抗体特异性结合 方法 间接法: 测定抗-HBs 夹心法：测定HBsAg和HBeAg 竞争法：测定抗-HBc和抗-HBe HBV实验诊断（4）－ 发光免疫法 利用抗原和抗体特异性结合 定量/半定量检测 敏感性和特异性高 监测血清学转换（HBsAg和HBeAg） 评价疫苗接种后的效果 HBV实验诊断（5）－核酸检测 核酸杂交 探针 PCR 引物 Taq DNA聚合酶 dNTP 荧光定量PCR PCR原理动画演示 HBV实验诊断（6）－HBV DNA定量 对治疗结局的预测和影响 基线状况 治疗中监测 HBV DNA定量测试的性能 HBV实验诊断（7） HBV基因分型 确定治疗方案 预测疗效 HBV 耐药突变株检测 是否更改治疗方案 HBV实验诊断（8）－报告及解释 HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 　临床意义 急性和慢性乙型肝炎主要HBV标志物存在模式 急性乙肝病毒感染恢复期典型血清学过程 慢性乙肝病毒感染进展的典型血清学过程 慢性乙肝的主要治疗措施 慢性乙型肝炎的总体治疗目标（中国慢性乙肝防治指南） 治疗疗程的长短取决于治疗终点 多数病人需要长期治疗! 慢性乙肝的抗病毒治疗的一般适应证 路线图概念: Ldt 的优化治疗 HCV分类和临床意义 Flaviviridae(黄病毒科) Hepacivirus (肝病毒属) 占输血后肝炎的80%~90% 传播途径：血液传播、性接触传播、母婴传播、家庭内接触传播等，但约半数途径不明 20多个基因型，Ⅰ~Ⅵ型常见 欧美各国流行者多为Ⅰ型 亚洲和我国流行者主要为Ⅱ型 HCV生物学特性（1） 球形，由包膜、衣壳和核心组成 HCV生物学特性（2） 单股正链RNA 一个ORF，9个基因区 HCV实验诊断（1）－免疫学检测 筛选试验 ELISA法 以C22、C33和NS5区蛋白作为包被抗原 未解决ALT正常或健康献血者存在假阳性问题 HCV实验诊断（2）－免疫学检测 筛选试验 阳性者，特别是一些不具明显危险因素者，需做确认试验 按照美国CDC 2003年抗－HCV报告和实验室检测指南，抗-HCV仅在重复检测S/CO≥3.8时才是真阳性，而对于S/CO＜3.8者需做确认试验或核酸检测 HCV实验诊断（3）－免疫学检测 确认试验 RIBA(重组免疫印迹法) 主要用于ELISA初筛检测可疑者 主要用于ELI