第七章_基因工程菌苗2013课件.pptVIP

第七章 基因工程菌苗P190 第一节 概述 1883年-1885年巴斯德（Pasteur）用理化和生物学方法制备了减毒的炭疽菌苗和狂犬疫苗等。 19世纪以来用菌苗免疫人畜，明显减少了传染病的发生。其中比较成功的是破伤风、白喉类毒素疫苗的应用，其效果可达95%以上。在发达国家破伤风、白喉、百日咳、嗜血性流感的发病率明显降低。抗菌药物的发明和应用，使临床常见的细菌性感染和病死率大幅下降。 第二节 目前应用的菌苗及其存在问题  一、目前应用菌苗的类别 按菌苗所含的成份，菌苗可分为3类，即减毒活菌疫苗、灭活死菌疫苗、纯化的多糖或蛋白成份疫苗。 第三节 重要细菌基因工程苗的研究进展P193 现有传统菌苗对重要细菌感染性疾病存在的问题： ①现有菌苗保护效果不好； ②副反应大； ③难以培养的细菌； ④可诱发癌变，有严重后遗症； ⑤新出现的病原体或新变异病原菌。 一.分类： O1群霍乱弧菌：古典生物型和埃尔托生物型。 不典型O1群霍乱弧菌 非O1群霍乱弧菌：O139 根据菌体抗原成份可分三种血清型 根据弧菌O抗原不同，分成多个血清群。第Ⅰ群有A、B、C三种主要抗原成分，A抗原为特异性抗原，与其他两个抗原成分相结合而成为: 稻叶型（原型，含AC） 小川型(异型，含AB) 彦岛型(中间型，含ABC) 。 2）增加免疫原性：细菌的成份如G-菌的细菌脂多糖（LPS）和G+菌的脂肽酸及细菌DNA中没有甲基化的序列等，都有佐剂活性，可增加释放DNA的免疫原性。 3）增加免疫途径：细菌载体还能进行口服，转染肠相关淋巴组织，促进黏膜免疫效果。他们可停留在吞噬泡中，也可通过分泌溶质膜素破泡而进入胞浆。控制抗原提呈的途径及相应的T细胞亚类的效应反应。 黏膜疫苗 黏膜疫苗可以通过激活机体黏膜和系统的免疫应答而阻止病原微生物的入侵,还可通过诱导抗原特异性的黏膜耐受而选择性地治疗自身免疫性疾病、变态反应性疾病及感染性的免疫病理紊乱等。 黏膜免疫的优点 不需要注射接种，在医疗条件并不发达的发展中国家，口服型或喷鼻型疫苗更具备推广的可能性。 黏膜疫苗比非胃肠道疫苗更容易接种; 黏膜疫苗伴随的风险比注射途径小 黏膜疫苗不会引起疼痛; 黏膜疫苗的生产工艺也较注射疫苗简化 黏膜疫苗和黏膜免疫 黏膜疫苗的分类： 按疫苗的有效成分划分，可以分为灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗 按免疫途径主要分为：口服型、喷鼻型、经阴道或直肠免疫途径 用胞内细菌释放DNA系统也存在危险因素： 1）入侵性虽然利于DNA释放，也存在毒力回复的危险。 2）G-菌的细菌脂多糖（LPS）也有毒性问题。 3）释放的DNA有整合到宿主细胞基因组的可能。 据菌体抗原霍乱弧菌可分为200个以上的血清型 目前流行的霍乱为O1和O139两种血清型。 目前使用的霍乱疫苗是灭活全菌体或全菌与其毒素的结合物，对成人有效，但不能诱发儿童免疫反应。 1.BS/WC灭活菌苗 由提取的或重组的霍乱毒素B亚单位（BS）及杀死的全菌细胞（WC）组成。 2.CVD103-HgR减毒活菌苗 在美国获准，为一次剂量的霍乱活菌苗。它是由霍乱经典型569B菌株构建而成的CVD103减毒株（CTA-B+）。并在其染色体溶血素基因nlyA位点插入汞抗性基因作为筛选标记。 3.以沙门氏菌为载体表达霍乱弧菌O抗原的伤寒/霍乱菌苗。 4.O139减毒菌苗候选株CVD112及Bengal-15 霍乱菌苗有四类： 另外，发现霍乱毒素（CT）是很强的黏膜免疫原，能有效刺激黏膜sIgA及血清IgG反应，及黏膜免疫记忆反应，对CT及CTB的免疫佐剂活性进行了大量的研究，对多种蛋白、多糖及病毒、细菌等的免疫佐剂效果得到肯定的认识。 CT/CT-B佐剂应用的抗原 （Walsh,1993） i.m S.mutans Gtf.1：：pho A融合蛋白 （Tomasi et al,1994） p.o,i.m 呼吸道合胞病毒FG糖蛋白（CT/CT-B） (Takahashi et al.,1990) i.m 流感病毒溶血素（CT/CT-B） ? S.Mutans蛋白质抗原（CT-B） （Czerkinsky et al,1989;Wu and Rusell,1993） p.o S.Mutans抗原I/II（CT/CT-B） ? ? （CT-B） ? ? 链球菌 （Bessen and Tischetti,1988） i.m 链球菌M蛋白（CT-B） （Jackson et al,1993） p.o 破伤风类毒素（CT） ? ? 蛋白质 参考文献 途径 抗原（佐剂） (Zhang et al,1995b) p