志贺菌gyra基因突变与耐药相关性研究.pdfVIP

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2018-08-19 发布于天津
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志贺菌gyra基因突变与耐药相关性研究.pdf

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24 6 CHINA BIOTECHNOLOGY 2004 6 GyrA * 王重振李雪萍钱雪琴钱利生 ( 200032) 收集114 株志贺菌流行株, 分别作血清分型和检查对喹诺酮类药物的敏感性; PCR 扩增耐药关的GyrA 基因片段, 作单链构象多态性( singlestrand conformation polymorphism, SSCP) 分析和序列测定; 最终研究突变与喹诺酮类耐药的关性结果发现我国志贺菌流行株仍以福氏志贺菌为主, 约占 82% ; 大多数福氏志贺菌株对环丙沙星诺氟沙星高度敏感, 敏感率分别为 8125%和741% ; 流行株GyrA 基因耐药关片段与野生菌株比, 部分菌株出现C( 248)T 单位点突变或C( 248)T 和A( 260)G 双位点突变; 卡方检验显示, C( 248)T 单位点突变基础上增加A ( 260)G 点突变与环丙沙星诺氟沙星耐药关, 故A( 260)G 可作为耐药监测位点; 另外, 可用 SSCP 分析PCR 扩增的GyrA 基因耐药关片断, 作为GyrA 基因耐药突变的粗筛方法志贺菌喹诺酮类药 GyrA 基因 SSCP DNA ( DNA Gyrase) 2 A 2 B , GyrA GyrB (DNA PCR ) 24D , , ; 12 , , 114 , [ 1] , DNA 13 [ 2,3] 2000 NCCLS , DNA 2 , GyrA [4, 5] GyrB , PCR ATCC25 22 GyrA , SSCP 14 PCR Gy rA , DNA SS , , , 8min, PCR : 5∀cgttggtgacgtaatcggta3∀5∀ggatgttggttgccatacct3∀ PCR : 2 # 5min; 30 , 4 # 1 1min, 55 # 1min, 72 # 2min; 1 1. 1 , 4 # 1min, 55 # 1min, 72 # 5min 1l PCR , ! - 20 #