口虾蛄oratosquillaoratoria同工酶的组织特异性及生化-海洋科学.pdfVIP

维普资讯 第 35卷 第3期 海 洋 与 湖 沼 Vo1．35．No．3 2004年 5月 0CEAN0LOGIA ETLIMNOLOGIA SINICA May，2004 口虾蛄 (Oratosquillaoratoria)同工酶的 组织特异性及生化遗传分析* 王春琳 母 昌考 丁爱侠 王 武” (宁波大学生命科学与生物工程学院 宁波 315211；上海水产大学生命科学与技术学院 上海 200090) (宁波大学生命科学与生物工程学院 宁波 315211) ”(上海水产大学生命科学与技术学院 上海 200090) 提要 采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳方法，研究分析了口虾蛄(OratosquiUaoratoria)肌 肉、眼球、腹鳃、心脏和肝胰腺5种器官或组织中LDH、ADH、MDH、SDH、MEP、POD、AMY、GDH、 SCD、EST、GLDH和 SOD共 12种同工酶的表达情况。结果表明，口虾蛄同工酶的表达具有明显 的组织特异性。对 12种同工酶进行生化遗传分析，获得了基本酶谱。12种同工酶共记录出 35个基因座位，其中11个基因座位 Ldh一3、Adh一1、Sdh一2、Est一1、Est一2、Est一3、Mdh、Mep一7、Gldh一 1、Gldh一2和 Scd一1为多态，其多态座位比例为31．43％。 关键词 口虾蛄，同工酶，组织特异性，生化遗传分析 中图分类号 Q178．53 口虾蛄 (OratosquiUaoratoria)隶属节肢动物 年取 自宁波月湖农 贸市场，共 36尾，体长为 门、甲壳纲、软甲亚纲、口足 目、虾蛄科、口虾蛄属 ， 11．2—12．5cm。对每尾 口虾蛄进行活体取样 ，取 又名东方虾蛄、虾蛄 ，广泛分布于中国、日本、韩国 眼球、肌肉、腹鳃、肝胰腺和心脏等 5种组织或器 以及东南亚地区。口虾蛄个体大、肉味鲜美，具有 官，直接进行分析或经编号后放入高温灭菌样品 较高的经济价值。关于 口虾蛄的生态学、生物学 管，置超低温冰箱 (一71oC)保存至分析。同工酶 特征和繁殖 习性 的研究已有报道 (王春琳等， 电泳采用聚丙烯酰胺凝胶 (PAGE)电泳。使用的 1996)。同工酶作为一种重要的生化指标 ，已被广 电极缓冲液为Tris一甘氨酸、TG、pH=8．3。样品的 泛应用于虾蟹类的物种及杂种鉴定(张子平等 ， 制备及结果处理参照相建海 (1999)，凝胶的制备 1994；张列士等，2000)、物种间亲缘关系 比较及 及电泳方法参照周宗汉等(1983)，凝胶染色参照 系统分类 (赵金 良等，1999)、胚胎发育过程 中的 胡能书等 (1985)、李思发(1998)、相建海 (1999)的 基因表达与调控 (李广丽等，2001；张志峰等， 方法。同工酶的缩写，基因座位和等位基因的命 1997)等的研究。同工酶在虾蛄上的应用，尚未见 名以及相关计算基本采用王中仁(1996)的方法。 相关报道。作者研究了口虾蛄不同组织同工酶的 2 结果 表达并进行了口虾蛄同工酶的生化遗传分析，以 期为 口虾蛄群体生化遗传结构研究及其种质资源 2．1 TG缓冲体系对同工酶的筛选结果 的合理开发利用与保护提供理论依据。 在 TG缓冲系统中对 17种同工酶进行筛选， 共选出12种同工酶用于 口虾蛄的生化遗传分析： 1 材料与方法 乳酸脱氢酶 (LDHE．C．1．1．1．27)、醇脱氢酶 口虾蛄 (Oratosquillaoratoria)于 2001和 2002 (ADHE．C．1．1．1．1)、酯酶(ESTE．C．3．1．1．1)、 * 国