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第30卷第3期 大豆科学 VoL30No．3
2011年 6月 SOYBEANSCIENCE Jun． 201l
农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化技术流程及操作要点
赵晓雯，吴芳芳，狄少康，柏 锡，纪 巍，李 勇，才 华，朱延明
(东北农业大学生命科学学院，黑龙江哈尔滨150030)
摘要：大豆遗传转化效率低，是大豆转基因育种亟待解决的重要问题。以大豆子叶节为外植体采用农杆菌介导
法，系统地研究了大豆子叶节遗传转化各技术环节的操作要点，包括工程菌液制备、无菌苗获得及外植体制备、农
杆菌的侵染及共培养、不定芽诱导、不定芽伸长、根诱导、驯化与移栽、抗性植株的获得及转基因植株的检测等，建
立了一套较稳定、高效的大豆子叶节遗传转化体系。并利用该体系，将野生大豆耐盐碱相关基因Al对大豆品种绥
农28、合丰50、合丰55、东农50进行遗传转化，系统地探讨了大豆基因型、影响T—DNA的转移效率的各环节、筛选
剂浓度及不同基因型转化效率等几个重要因素。
关键词：大豆；遗传转化；农杆菌介导；子叶节；技术流程
中图分类号：$565．1 文献标识码：A 文章编号：1000—9841(2011)03-0362-07
flowand Pointsof Genetic
Technique KeyOperation
Transformationof Node
SoybeanCotyledonary
ZHAO Xi，JI Hua，ZHU
Xiao-wen，WUFang-fang，DIShao—kang，BAIWei，LIYong，CAI Yan-ming
ofLife
(CollegeScience，NortheastAgieulturalUniversity，Harbin150030，Heilongjiang，China)
low transformationwasoneofthedifficult thatneededberesolvedin
Abstract：Thesoybean frequency problems soy—
genetic
this nodewasusedaft the flowand
bean key
transgenicbreeding．Instudy，thesoybeaneotyledonary explants，andtechnique
of transformation and
operationpointsAgrobacterium-mediatedmethod，includingAgrobacteriumpreparation，explantaseptic
and bud of
CO·cultivation，adventitiousinduction。shootelongation，regenerationtransgenic
seedlingpreparation，infection
ofantibioticresistantdetectionoftransgenieplants，wassystematicallyinvestigated．
pl
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