丁酸钠对重症急性胰腺炎大鼠.docVIP

丁酸钠对重症急性胰腺炎大鼠[摘要]　目的　探讨丁酸钠（NaB）对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响。　方法　30只SD大鼠分成对照组、SAP组及NaB治疗组，每组各10只，采用牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制作SAP动物模型，NaB治疗组为SAP制模5　min后通过股静脉注射NaB（5　mg/kg）。检测血清淀粉酶、胰腺湿干重比值，利用Kusske方法对胰腺组织的病理学改变：水肿、出血、坏死、炎细胞浸润进行计分，TUNEL法检测胰腺腺泡细胞凋亡。　结果　SAP组血清淀粉酶与对照组比较明显升高，差异有高度统计学意义（P　　30％。③出血：0＝无；1＝有。④炎性细胞浸润：计数高倍视野下血管周围或小叶内白细胞数量，0＝0～1个；1＝2～10个；2＝11～20个；3＝21～30个；4＝　＞　30个或出现微脓肿。胰腺损伤积分=　①+②+③+④。 1.3.4　胰腺腺泡细胞凋亡检测 TUNEL法检测胰腺组织腺泡细胞凋亡，胰腺组织常规石蜡包埋切片，严格按照说明书操作。细胞核中有出现棕黄色颗粒者为阳性细胞，即凋亡的胰腺腺泡细胞。每张切片染色阳性区域随机选取5个高倍视野（400×），计算500个腺泡细胞中阳性细胞所占的百分比，即为凋亡指数（apoptosis　index，AI）。 1.4　统计学方法 采用统计软件SPSS　11.5对实验数据进行分析，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。以P　　0.05为差异有统计学意义。 2　结果 2.1　各组大鼠血清淀粉酶水平及胰腺组织湿/干重比值测定结果 SAP组血清淀粉酶水平明显升高，对照组可能因为翻动胰腺时造成水肿，淀粉酶亦轻度升高。SAP组血清淀粉酶与对照组比较明显升高，差异有高度统计学意义（P　　0.01）；NaB治疗组血清淀粉酶较SAP明显下降，差异有统计学意义（P　　0.05）。SAP组大鼠胰腺组织湿/干重比值与对照组比较升高明显，差异有高度统计学意义（P　　0.01）；NaB治疗组胰腺组织湿/干重比值较SAP组下降，差异有统计学意义（P　　0.05），说明NaB对减轻胰腺水肿有一定作用。见表1。 　　2.2　各组大鼠胰腺损伤积分及胰腺腺泡细胞凋亡检测结果 正常大鼠胰腺肉眼观呈淡粉红色，薄片状，颜色均匀一致、光泽度好，无水肿，腹腔内无腹水。SAP大鼠胰腺有明显改变，具体表现为，腹腔内有血性腹水，胰腺与周围脏器有粘连，有时可见胰腺片状坏死，腹腔内皂化斑多见。光镜下见腺泡间、小叶间组织水肿，散在炎性细胞浸润，胰腺组织出血、坏死，部分腺泡结构消失。SAP组胰腺损伤积分明显高于对照组，差异有高度统计学意义（P　　0.01），NaB治疗组胰腺损伤积分明显低于SAP组，差异有统计学意义（P　　0.05）。SAP组胰腺腺泡细胞凋亡指数高于对照组，差异有高度统计学意义（P　　0.01），NaB治疗组胰腺腺泡细胞凋亡指数显著高于SAP组，差异有统计学意义（P　　0.05），说明NaB可以有效诱导重症急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞发生凋亡，减轻炎症反应。见表2。 3　讨论 重症急性胰腺炎的治疗效果仍不能令人满意，究其原因就是对重症急性胰腺炎的发病机制仍未能完全阐明。细胞凋亡是由基因控制的细胞自主、有序性的死亡，是一种生理性调节机制，不破坏细胞生存环境。Kaiser等[4]通过实验研究发现重症急性胰腺炎标本有大量的坏死组织及脓肿形成，但只有少量凋亡细胞；而急性水肿性胰腺炎标本则出现相对较多的胰腺腺泡凋亡细胞，炎症反应轻。据此推测胰腺腺泡凋亡与急性胰腺炎严重程度呈负相关，腺泡细胞凋亡指数越高则胰腺炎的程度越轻，细胞凋亡在胰腺炎的发病机制中是一种保护现象。 NaB是膳食纤维在肠道中酵解后产生的主要短链饱和脂肪酸。NaB及其稳定的衍生物能够影响多种生理过程，是包括乳腺癌和结肠癌在内的多种肿瘤的生长抑制剂和分化剂。最近的研究证明NaB能够通过多种机制诱导肿瘤细胞和多种非肿瘤细胞的凋亡[5-7]。但NaB诱导胰腺腺泡细胞凋亡以及NaB对SAP及其并发症的治疗作用方面的研究目前较少。本研究结果显示，重症急性胰腺炎大鼠使用丁酸钠可以有效改善胰腺的炎症反应，通过诱导胰腺腺泡细胞凋亡减轻胰腺的病理损害，继而减轻胰外器官的病理损害，减少并发症的发生，有效改善重症胰腺炎的预后，但是具体机制尚不清楚。 通过本实验结果笔者推断，细胞凋亡是是重症急性胰腺炎病变发展过程中的一个重要特征，并且可能左右病情的演变。细胞凋亡发生时，细胞内的多种酶原释放到细胞外明显减少，细胞生存环境不受破坏，引起炎症反应轻微，诱导胰腺腺泡细胞凋亡可以减轻急性胰腺炎的严重程度[8-10]。 SAP的发生发展是一个复杂过程，有胰酶自身消化学说