蛋白质晶体的生长冻存及装载.pptVIP

* * * 在96孔板中培养得到的β2肾上腺素G蛋白偶联受体的晶体 晶体被装载到30或50μm孔径的MiTeGen MicroMounts loop中 微晶衍射图，由27颗微晶得到了一套完整的2.4?的数据 Cherezov et al., Science. 2007 318:1258-1265 谢谢！ * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 蛋白质晶体的生长、冻存及装载 技术交流 晶体培养 A. McPherson, CHSL 2008 晶体培养 – 原理 A. McPherson, CHSL 2008 晶体培养 – 原理 A. McPherson, CHSL 2008 晶体培养 – 原理 A. McPherson, CHSL 2008 晶体培养 – 原理 Direct mixing to immediately create a supersaturated condition (Batch Method) Alter temperature Alter salt concentration (salting in or out) Alter pH Add a ligand that changes the solubility of the macromolecule Alteration of the dielectric of the medium Direct removal of water (evaporation) Addition of a polymer that produces volume exclusion Addition of a cross bridging agent Concentration of the macromolecule Removal of a solubilizing agent A. McPherson, CHSL 2008 晶体培养 – 材料 拭镜布 池液 硅化玻片 蛋白样品 16孔板 真空硅脂 晶体培养 – 真空硅脂 晶体培养 – 加入池液 晶体培养 – 点蛋白溶液 晶体培养 – 混和池液 God, plz give me a crystal so that I can graduate... 晶体冻存 – 材料 空气罐 Cryo Tong Loop Tab 夹子 冻存架 处理晶体工具 晶体 晶体冻存 – 准备液氮 晶体冻存 – 准备夹子 晶体冻存 – 试保护剂（液氮法） 晶体冻存 – 试保护剂（液氮法） 晶体冻存 – 捞晶体 晶体冻存 – 捞晶体 晶体冻存 – 冻晶体 晶体冻存 – 存晶体 晶体装载 – 原理 Bernhard Rupp, Crystal 101 晶体装载 – 衍射仪 照明灯 发射器 准直镜 探测屏 液氮系统 测角头 晶体装载 – 衍射仪 液氮气 X射线 底座 X、Y轴 Z轴 旋转 晶体装载 – 衍射仪（氦气） 晶体装载 – 衍射仪（控制面板） 晶体装载 – 衍射仪 记住三点 检查氦气 开门摁“DOOR” 别碰紧急按钮，除非很紧急 晶体装载 – 取晶体 晶体装载 – 取晶体 晶体装载 – 装晶体 And you pray again... But... ～8? * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *