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Wnt1诱导分泌蛋白1在直肠癌中表达及其临床意义
Wnt1诱导分泌蛋白1在直肠癌中表达及其临床意义
作者:田超 周总光 孟文建 李立 于永杨 杨烈 雒洪志 周宾
【摘要】 目的 定量检测Wnt1诱导分泌蛋白1(Wnt1 induced secreted protein1,WISP1)基因在人直肠癌及远端正常直肠组织中的表达,为进一步研究该基因功能提供线索。方法 提取人直肠癌及癌旁正常直肠组织总RNA,采用实时RTPCR分析WISP1的表达,再对PCR结果进行分析。结果 WISP1 mRNA在直肠癌组织中的表达水平显著高于癌旁正常直肠组织,差异有统计学意义(Plt;0.05)。WISP1的表达与肿瘤的分化程度、Dukes分期及淋巴结转移等因素有相关性。结论 WISP1基因的异常表达可能与直肠癌的发生、发展有关,有望成为直肠癌诊断预后的标志物和治疗的新靶点。
【关键词】 Wnt1诱导分泌蛋白1基因; 直肠肿瘤; mRNA
Expression of Wnt1 induced secreted protein1 in rectal cancer and its clinical significance
【Abstract】 Objective To provide basis for further study of Wnt1 induced secreted protein1 (WISP1) gene by quantitatively detecting its expression in rectal cancer tissues and distal normal rectal tissues. Methods Realtime RTPCR was used to detect the expression of WISP1 mRNA in 86 samples of rectal cancer tissues and distal normal rectal tissues. Results The average level of WISP1 mRNA expression in rectal cancer tissues was 7.744 times than that in normal rectal tissues, with statistical significance (Plt;0.05). The level of WISP1 mRNA expression was correlated with tumor differentiation, Dukes stage and lymph node metastasis. ConclusionsThe abnormal expression of WISP1 gene may play an important role in the carcinogenesis and development of rectal cancer. WISP1 may be helpful for prognostic evaluation and gene therapy in rectal cancer.
【Key words】 Wnt1 induced secreted protein1 gene; Rectal caner; mRNA
结直肠癌的发生、发展是多基因,多事件积累的结果。通过多年来的研究发现Wnt1信号传导途径异常激活参与了人类结直肠癌的发生[1]。Pennica等[2]研究表明Wnt1诱导分泌蛋白1(Wnt1 induced secreted protein1,WISP1)是Wnt1信号通路的下游靶基因之一。本实验采用实时RTPCR方法检测直肠癌中WISP1 mRNA的表达,为深入研究WISP1基因与直肠癌的发生、发展提供线索。
1 材料与方法
1.1 标本取材
收集四川大学华西医院普外科2003-2004年确诊的86例直肠癌患者资料,其中男44例,女42例。各病例分别取直肠癌组织以及相邻远端正常直肠黏膜组织。组织在离体30 min内取材, 并于液氮速冻置于-70 ℃冰箱保存备用。所取标本均经病理检查证实。
1.2 主要试剂
逆转录酶MMLV为Takara公司产品; Trizol试剂为Gibco公司产品; DEPC、 DNaseⅠ、 RNase为Sigma公司产品;引物和探针由Takara公司合成。
1.3 总RNA提取及逆转录反应
按RNA抽提步骤用Trizol抽提组织中总RNA,紫外分光光度法测定260 nm和280 nm的吸光度(A值), 甲醛变性凝胶电泳观察其完整性, 只有A260/
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