免疫组化指标在乳腺癌组织中表达及其应用价值.docVIP

免疫组化指标在乳腺癌组织中表达及其应用价值 　　[摘要] 目的 探讨免疫组化指标Ki67、VEGF、p53与C-erbB-2在乳腺癌组织中的表达与意义。 方法 将本院2012年4月～2014年4月收治的70例乳腺癌患者作为研究对象，术后取病理组织，采用免疫组化法检测乳腺癌组织中Ki67、VEGF、p53与C-erbB-2的表达水平，分析其与乳腺癌病理因素的相关性。 结果 Ki67在乳腺癌组织中表达阳性率最高(75.71%)，其次为C-erbB-2(67.14%);腺癌组织Ki67表达水平与乳腺癌患者肿瘤分期有显著相关性，癌症分期越高，乳腺组织Ki67阳性率越高，C-erbB-2表达阳性率与乳腺癌患者年龄相关，年龄越轻者，乳腺C-erbB-2阳性率越高，p53与VEFG阳性率与患者年龄、肿瘤直径、肿瘤分期均未体现明显相关性。 结论 乳腺癌患者乳腺组织中Ki67表达的阳性率与癌症分期呈正相关，C-erbB-2的表达水平与患者年龄有密切联系，且Ki67阳性表达与C-erbB-2及p53表达呈正相关，可将Ki67指标作为评估乳腺癌患者病情进展的重要标志。 　　[关键词] 乳腺癌;免疫组化指标;表达;相关性 　　乳腺癌是临床常见女性恶性肿瘤之一，有较高的发病率[1]，且统计资料显示，全球范围内每年新增乳腺癌病例超过100万，超过15%的恶性肿瘤患者死于乳腺癌。当前乳腺癌已成为威胁女性身体健康的关键疾病。有报道显示，肿瘤的产生、进展均与细胞的增殖存在一定的相关性[2]。Ki67是增殖细胞相关核抗原中的一种，近年来，有大量研究证实可将Ki67作为评估乳腺癌肿瘤增殖活性的相关标志物，其有较好的灵敏度与特异度[3-4]。基于此，本组采用免疫组化法对乳腺癌组织中Ki67、VEGF、p53、C-erbB-3表达水平进行检测分析，旨在证实其在乳腺癌组织中的表达及应用价值。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　将本院自2012年4月～2014年4月收治的70例乳腺癌患者作为研究对象。取患者乳腺癌术后病理组织标本作为研究标本。所有纳入研究患者均经病理学检查确诊为乳腺癌，均为女性，术前均未接受化疗、放射治疗等抗癌治疗手段，纳入前均接受血常规、肝肾功能常规、胸片、腹部超声及盆腔超声检查，排除癌症远端转移患者。年龄29～83岁，平均(48.2plusmn;1.6)岁;乳腺癌分期：Ⅰ期20例，Ⅱ期39例，Ⅲ期11例;肿瘤分类：导管内癌1例，浸润性导管癌64例，黏液腺癌4例，浸润小叶癌1例。 　　1.2 试剂与方法 　　免疫组化染色一抗Ki67、VEGF、P53与C-erbB-2工作液。将所有纳入研究组织标本均给予甲醛液固定1 d，作石蜡包埋，连续切片，贴于含APES的载玻片上，在60℃条件下烘烤2 h。随后作免疫组化染色。常规石蜡切片后脱蜡，在浓度为3%的双氧水室温下孵育10 min左右，清除过氧化物酶活性，行蒸馏水冲洗，PBS洗涤，浸泡，时间为5 min。后作抗原修复，血清封闭，在室温条件下孵育10 min，弃血清，加入四种一抗工作液，在37℃温度环境下孵育2 h，作PBS洗涤，重复3次，5 min/次，滴入二抗，加入辣根酶标记物，孵育0.5 h后，作PBS洗涤，重复3次。作DAB显色处理，随后采用清水冲洗，复染，最后作封面处理。并将阳性标本作为对照标准，以PBS作为阴性对照。每张切片均至少取3个高倍视野，观察细胞颜色及比例。 　　1.3 阳性结果判定标准 　　①Ki67细胞阳性：细胞多数呈棕黄色，核着色表现，少数呈弱细胞质染色;p53细胞阳性：呈棕黄色、核着色表现，少部分呈现较弱细胞质染色表现;VEGF阳性：胞浆着色;阴性：不着色。阴性(-)：阳性细胞数低于10%。②Ki67、p53及VEGF阳性程度标准：弱阳性(+)：阳性细胞数10%～25%;阳性(++)：阳性细胞数gt;25%～50%;强阳性(+++)：阳性细胞数超过50%。③C-erbB-2阳性：膜着色，着色细胞数超过10%。阴性：不着色;弱阳性：着色弱，不连续;阳性：着色中等，部分不连续;强阳性：着色强，且呈连续性表现。 　　1.4 统计学方法 　　采用SPSS 19.0统计学软件处理数据。计数资料以率表示，采用chi;2检验。等级资料用非参数秩和检验。以P lt; 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 Ki67、VEGF、p53与C-erbB-2在乳腺癌组织中的表达情况 　　Ki67在乳腺癌组织中表达阳性率最高，为75.71%，其次为C-erbB-2，为67.14%(表1)。 　　2.2 Ki67、VEGF、p53与C-erbB-2的表达与病理因素的关系 　　乳腺癌组织Ki67表达水平与乳腺癌患者年龄、肿瘤直径无明显联系，但与乳腺癌患者肿瘤分期有显著相关性，癌症分期越高