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免疫组化方法探究女性胎儿尿道括约肌神经支配 　 作者：杨荣辰　周荣祥　王鹏　陈强 【摘要】 　　目的 探讨支配女性尿道括约肌神经纤维的定位、定量及定性。方法 12例21周至40周的女性胎儿尿道，分别进行石蜡包埋、胆碱乙酰基转移酶(choline acetylcatransferase, CHAT)及神经肽Y(neuropeptide Y, NPY)免疫组化染色，并对其结果进行半定量和定量分析。结果 从尿道内口至外口，神经肽Y阳性区域显色范围逐渐变小、强度减弱，胆碱乙酰基转移酶阳性区域主要位于尿道中三分之一，统计学上具有显著性差异。结论 尿道括约肌的胆碱乙酰基转移酶及神经肽Y免疫组化染色对理解参与控尿的尿道括约肌神经支配提供了很有价值的帮助。 【关键词】 控尿　神经支配　尿道括约肌　免疫组织化学 　　Innervation of the female human fetus urethral sphincter by immunohistochemical studies 　　ABSTRACT: Objective To explore the location, quantity and nature of nerve fibers innervating the urethral sphincter. Methods Urethra of 12 female human fetuses between 21 and 40 weeks of gestation were treated by paraffin embedded with choline acetylcatransferase (CHAT) and neuropeptide Y(NPY) immunohistochemical staining. The staining results were analyzed quantitatively and semiquantitatively. Results From the urethra internal orifice to external orifice, the positive region of NPY became smaller and the density thinner; the positive region of CHAT was mainly located in the middle part of arethra, and there was statistically significant difference between them. Conclusion The immunohistochemical staining of choline acetylcatransferase and neuropeptide Y in the anatomical structures of the urethral sphincter provides a better understanding of the origin and nature of the innervation participating in urinary continence. 　　KEY WORDS: urinary continence; innervation; urethral sphincter; immunohistochemitry 　　女性尿道括约肌的内在机制是由平滑肌和横纹肌成分组成，它们各自接受相互独立的神经支配，这些机制目前尚不十分清楚[1]。大多数学者认为女性尿道括约肌是由来自阴部神经(躯体神经)和盆丛(自主神经)的神经纤维共同支配[2]，但有关女性尿道括约肌及其支配神经精确的定位、定量及定性方面的研究在国内外报道较少。本实验采用免疫组织化学染色及显微图像分析技术，对国人正常女性胎儿尿道的胆碱能及肾上腺素能神经进行定位、定量研究，从而探讨它们在控尿方面的作用。 　　1 资料与方法 　　1.1 资料 选取12个正常女性胎儿，21-40周胎龄。测其冠臀长度为165-340mm，胎儿死亡1h内完整取下尿道，尿道长度为9-15mm，另取成人新鲜大脑皮质及肾上腺髓质标本做阳性对照，以上标本均经40g/L多聚甲醛固定后石蜡包埋。 　　我们应用12个21-40周胎龄的女性胎儿尿道，是因为胎儿在妊娠15周时横纹肌和平滑肌之间已显示出明显的区别[3]，这个阶段的胎儿能够在肉眼下解剖，括约肌的基本类型已经建立[4]。 　　1.2 试剂和仪器 NPY多克隆抗体购自武汉博士德生物制药有限公司，CHAT多克隆抗体及ABC检测试剂盒购于北京中杉金桥生物技术有限公司，Biogenex i6000全自